血浆hs-CRP、vWF及其裂解酶含量与急性冠脉综合征

　　作者：陈劲松,匡希斌　　作者单位：东莞市厚街医院，广东 东莞 523945;南华大学附属第二医院

　　【摘要】目的检测不稳定型心绞痛(UAP)、急性心肌梗死(AMI)等急性冠脉综合征(ACS)患者血浆中高敏C反应蛋白(hs-CRP)和血管性血友病因子(vWF)及其裂解酶(vWF-cp)水平，探讨它们在ACS发病机制中的作用和相互联系。方法：研究对象分UAP组和AMI组(入院即刻采血)，稳定型心绞痛(SAP)组和正常对照组(于入院次日空腹采血)，各组均17例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆vWF浓度和hs-CRP含量，以残余胶原结合力试验测定血浆vWF-cp活性水平。所有入选对象均行冠状动脉造影证实。结果：①UAP组和AMI组血浆hs-CRP与vWF水平均高于SAP组和正常对照组﹙P<0.01﹚;②UAP组和AMI组血浆vWF-cp活性水平均低于SAP组和正常对照组﹙P<0.01﹚;③ACS患者血浆hs-CRP与vWF水平间呈显著正相关(r=0.67,P<0.01)，而血浆vWF-cp与vWF、hs-CRP无明显相关关系。结论：①血浆hs-CRP、vWF水平升高可能是预测ACS斑块破裂和血栓形成的指标;②血浆vWF-cp活性降低 在ACS血栓形成中可能起重要作用。

　　【关键词】 冠状动脉疾病,C反应蛋白质,血管性血友病因子

　　Abstract：Objective:To evaluate the role of plasma high sensitivity C-reactive protein(hs-CRP),von Willebrand factor(vWF),von Willebrand factor|cleaving protease(vWF-cp) in the pathogenesis of acute coronary syndrome(ACS).Methods:In 34 ACS patients,17 unstable angina pectorix(UAP) patients composed UAP group and 17 acute myocardial infarction(AMI) patients composed AMI group.Another 17 stable angina pectoris(SAP) patients composed SAP group,17 healthy persons regard as control group.Plasma contents of vWF and hs-CRP were measured using enzyme like immunosorbent assay (ELISA).The plasma vWF-cp activity was measured by residual collagen binding activity (R-CBA).Coronary angiography was performed in all patients and normal control persons.Results:①Plasma levels of hs-CRP,vWF were significantly higher in patients with ACS than those with SAP and normal controls(P<0.01);②The plasma vWF-cp activity was significantly lower in patients with ACS than those with SAP and normal controls(P<0.01);③ In ACS patients the level of vWF in plasma was positively correlated with hs-CRP(respectively r=0.67,P<0.01 ),but vWF and hs-CRP were no obvious relationship with vWF-cp(P>0.05).Conclusion: ①The increased plasma hs-CRP and vWF levels may be predictors of the plaque rupture and thrombosis in ACS patients;②The decreased plasma vWF-cp activity would play an important role in the thrombosis of ACS.

　　Key words：Coronary artery disease;C-reactive protein;von Willebrand factor;

　　研究表明，冠状动脉内易损粥样硬化斑块破裂以及继发的血栓形成是急性冠脉综合征(ACS)的主要发病机制，高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管性血友病因子(vWF)、血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)在冠状动脉血栓形成中起重要作用，本研究拟通过检测ACS病人血液中hs-CRP、vWF、 vWF-cp水平，探讨它们在ACS发病机制中的作用和相互联系。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　根据2001年中华医学会心血管分会诊断标准随机入选2004年7月至2005年2月住院冠心病病人51例，其中不稳定型心绞痛(UAP)和急性心肌梗死(AMI)患者各17例，分别构成UAP组和AMI组，稳定型心绞痛(SAP)17例为SAP组，另有正常对照组17例，所有冠心病患者及对照组均行冠状动脉造影检。排除：①慢性肝、肾、免疫、血液系统疾病，感染性疾病以及诱发血栓形成的其他疾病(心房颤动、风湿性心瓣膜病、恶性肿瘤等);②既往有经皮腔内冠脉成形术、支架置入及冠脉旁路移植术病史;③入院前服用过抗血小板，抗凝药物及止血药物;④入院前AMI已行溶栓治疗;⑤糖尿病。

　　1.2 方法

　　对照组和SAP组于入院次日空腹取外周肘静脉血，UAP组和AMI组入院后即刻取外周肘静脉血4.5ml，注入含有1∶10体积的枸橼酸钠抗凝离心管，1 h内以3 000 r/min离心10 min，提取血浆装于低温冷冻管中，置于-70℃冰箱内保存。应用苏州大学血栓室建立的抗vWF双抗体夹心ELISA法测定血浆vWF浓度。血浆vWF-cp活性测定：按照Rick等所建立的胶原结合试验并略作改进[1，2]测定之。以酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定血浆hs-CRP浓度。

　　1.3 统计学处理

　　应用SPSS 10.0版统计软件进行分析处理，计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间均数比较采用t检验，多组(两组以上)均数间比较采用方差分析，多组均数两两比较采用q检验，相关性采用Pearson相关分析，以双侧α=0.05为检验水准。

　　2 结果

　　2.1 各研究组之间基本特征比较

　　2.2 血浆hs-CRP、vWF和vWF-cp水平与ACS的关系

　　2.3 hs-CRP与vWF、vWF-cp的相关性及其与血脂的相关性

　　直线相关分析表明hs-CRP含量与vWF浓度呈正相关(r=0.67,P<0.01)，直线回归方程y=41.965+14.004x，而hs-CRP与vWF-cp，vWF与vWF-cp无明显相关关系(P均>0.05)。将患者hs-CRP、vWF、vWF-cp与常规检查的血脂各项指标比较均无直线相关关系(P均>0.05)。

　　3 讨论

　　冠状动脉易损粥样斑块破裂,表面破损或裂隙,随后继发血小板聚集和血栓形成,引起冠状动脉急性完全或不完全堵塞是引发ACS的主要病理机制[3，4]。在导致斑块破裂的因素中,炎症是ACS的基础,炎症因子促进ACS的发生和发展[5]。血浆hs-CRP具有高敏感性和精确性,在炎症因子中具有代表性,且hs-CRP的浓度没有昼夜变异。近年来美国食品与药物管理局(FDA)将hs-CRP测定作为预测ACS的方法之一[6]。本研究发现ACS组患者的hs-CRP水平明显高于SAP组和正常对照组，而SAP组和正常对照组之间比较差异无统计学意义。这表明hs-CRP水平只在心脏有急性炎症反应和损伤的ACS时才明显升高，在组织损伤程度较轻的SAP患者中升高并不明显，表明hs-CRP水平的增高与冠状动脉炎症反应程度和组织损伤程度密切相关，与文献研究结果一致[7]。Sano等[8]运用血管内超声证明在AMI患者中，hs-CRP含量与粥样斑块破裂密切相关，hs-CRP升高程度可反映破裂斑块的炎症活动性，提示临床上可将hs-CRP作为评价粥样斑块易损性的非侵入性指标。

　　除炎症外，还有其他重要因素导致动脉硬化斑块的破裂，如易形成血栓的血液——易损血液。vWF是人体内止血与血栓形成中的主要糖蛋白之一,血浆vWF主要由血管内皮细胞合成,储存在内皮细胞的Weibel-pallade小体内,血浆中的vWF水平可反映血管内皮细胞受损程度和高凝状态并可作为治疗、判断预后的评价指标之一[9],当斑块破裂,内皮细胞受到破坏后释放入血.介导血小板粘附于受损血管壁,启动血栓形成。本研究发现，ACS患者血浆vWF水平与SAP患者和对照组比较显著增高(P<0.01)与国内外研究结果一致[10～12]。本研究进一步发现SAP组的vWF水平与正常对照组相比有增高趋势但并无显著性差异，这表明vWF水平只在心脏有急性炎症反应和损伤的ACS时才明显增高，因此，vWF可能是识别易损斑块和预测血栓形成的实验室指标之一。本研究发现在ACS急性期vWF与hs-CRP呈显著正相关，提示炎症反应可能参与了冠状动脉粥样硬化斑块的易损性，并加重了冠状动脉内皮功能的损害和促进高凝状态。

　　vWF介导血小板与内皮下组织粘附并进而形成血栓的能力与其多聚体的大小密切相关,其中大分子的多聚体作用更强[13],vWF-cp是新近发现的一种血浆金属蛋白酶，它主要水解大分子量的vWF多聚体成小分子的肽段[14]，因此vWF-cp可以通过对vWF多聚体大小的调控来调节vWF多聚体与内皮下胶原和血小板的粘附能力,从而影响血栓的形成。vWF-cp的降低可能会促使血管内形成富血小板血栓[15]。本研究结果表明，ACS患者血浆vWF-cp活性显著低于SAP患者和对照组(P<0.01)，进一步分析表明UAP患者与AMI患者无明显差异(P>0.05)，SAP患者与正常对照组比较轻度下降，但并无统计学差异(P>0.05)，提示vWF-cp在ACS血栓形成中可能起着重要作用。ACS患者血浆vWF-cp活性显著降低可能与以下几方面的原因有关：炎症反应，斑块破裂损伤血管内皮细胞，使贮存于内皮细胞Weibel-Palade小体中的大分子量的vWF多聚体释放出来，过多的大分子量的vWF可能消耗性地使血循环中的vWF-cp减少，导致vWF-cp活性下降[15];此外，vWF-cp的活性受vWF水平的调节,vWF水平增高，vWF-cp的活性降低，可能与vWF对该酶本身或相关的调节因子、辅助因子进行调控，致使酶活性降低有关[16]。但本研究未发现vWF-cp与vWF之间在ACS急性期有明显相关关系﹙r=-0.042，P=0.815﹚。同时发现hs-CRP与vWF-cp之间在ACS急性期亦无明显相关关系﹙r=-0.236，P=0.179﹚。今后有待扩大样本进一步研究。

　　综上所述，hs-CRP、vWF、vWF-cp在ACS发生发展中起重要作用，深入研究它们在ACS中的机制，对研制治疗ACS的安全有效的抗炎药物可提供理论依据，国外已经获得了重组的人vWF-cp[17]，利用重组人vWF-cp的治疗，可能有助于减少ACS患者血栓的发生。

　　致谢：本研究得到苏州大学血液研究所阮长耿院士及南华大学严鹏科博士无私的帮助和指导，在此衷心感谢。

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