哮喘患儿血清白细胞介素17水平测定

　　作者：饶璐飞， 朱晓萍1**， 周志江2， 程 萍3 作者单位：(1.贵阳医学院附院 儿科， 贵州 贵阳 550004; 2.贵阳市儿童医院， 贵州 贵阳 550004; 3.贵阳医学院附院 免疫室， 贵州 贵阳 550004)

　　【摘要】 目的： 通过测定哮喘患儿血清白细胞介素17(IL17)水平，探讨其在哮喘发病机制中的作用。方法： 收集50例哮喘急性发作期患儿及30例健康儿童的静脉血，采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血清IL17水平。结果： 哮喘急性发作期患儿血清IL17水平与正常对照组相比明显升高，差异有统计学意义(t=2.156，P<0.05)。结论： IL17可能参与了儿童哮喘的发病过程。

　　【关键词】 哮喘; 儿童; 白细胞介素17; 血清学

　　A Preliminary Study on Determination of Serum

　　IL17 Levels of Children with Asthma

　　RAO Lufei1, ZHU Xiaoping1**, ZHOU Zhijiang2, CHENG Ping3

　　(1. Department of Pediatrics, The Affiliated Hospital of Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China;

　　2. Guiyang Children's Hospital, Guiyang 550003, Guizhou, China;3. Department of Immunology,

　　The Affiliated Hospital of Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China)

　　[Abstract] Objective: To explore the effect of IL17 on the immune pathogenesis of asthma in children by observing its serum levels. Method: Blood samples were taken from 50 asthma children and 30 healthy children. ELISA was used to measure the serum levels of IL17 of these samples. Result: The serum levels of IL17 in children with asthma were significantly higher than those of the control group, and there was significant difference between the two groups (t=2.156，P﹤0.05). Conclusion: IL17 may be involved in the immune pathogenesis of asthma in children.

　　[Key words] asthma;child; interleukin17;serology

　　支气管哮喘是严重威胁公众健康的慢性呼吸道炎症性疾病，全世界约有3亿人患哮喘[1]，且其患病率呈明显上升趋势，严重影响了患儿的身心健康及生长发育。白细胞介素17(IL17)是由Th17细胞分泌的一种前炎性细胞因子，近来发现IL17是哮喘发病相关细胞因子网络的重要成员之一，在T细胞的激活、中性粒细胞在气道的募集及活化方面具有重要作用，参与了呼吸道炎症和呼吸道重塑。目前国内对IL17在儿童哮喘发病机制中的作用研究较少，2008年6月～2009年1月应用ELISA法检测哮喘患儿血清IL17水平，研究其在哮喘发病中的作用，进一步了解哮喘的免疫学发病机制，为哮喘的治疗提供新的策略。

　　1 材料与方法

　　1.1 一般资料 儿科哮喘门诊确诊为哮喘急性发作期患儿50例，男29例，女21例，年龄0.83～12岁，平均(5.36±3.25)岁，按2003年全国儿童哮喘防治协作组修订的儿童哮喘标准[2]诊断，发病前4周均未使用过糖皮质激素类药物及免疫调节剂;对照组30例为幼儿园健康体检儿童，男18例，女12例，年龄1～8.08岁，平均(5.42±2.13)岁，近1个月无急性呼吸道感染，既往无喘息病史，无家族哮喘病史，无个人和家族过敏性疾病史，均无心、肺、肝、肾等重要脏器疾病。两组性别、年龄经统计学比较差异无显著性，具有可比性。

　　1.2 方法 所有研究对象均无菌抽取静脉血3 ml，置于无抗凝的无菌试管中30 min，以2000 r/min离心15 min分离血清，吸取血清放入Ependoff管中，置于-20℃冰箱保存待检。采用双抗夹心ELISA法，IL17试剂盒由法国Diaclone公司提供，操作严格按试剂盒说明书进行。

　　1.3 统计学处理 所有实验数据采用SPSS 11.5统计软件进行整理与分析。计量资料进行正态性检验，正态分布的数据用(x±s)表示，偏态分布数据用中位数与四分位数间距表示，比较前经变量转换为正态，采用成组设计两样本均数比较的t检验，计数资料间的比较采用卡方检验，检验水准α定为0.05，P<0.05差异有显著性。

　　2 结果

　　哮喘组血清中IL17水平显著高于正常对照组，差异有显著性(t=2.156，P<0.05)。结果见表1。注：(1)与对照组相比,P﹤0.05。

　　3 讨论

　　支气管哮喘是全球范围内严重威胁人类健康的、反复发作的慢性呼吸道疾病，涉及各个年龄，也是儿童时期最常见的慢性疾病，严重影响着患儿的健康和生长发育。哮喘是以气道高反应性(AHR)和慢性气道炎症为特征的变态反应性疾病，是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞等多种炎症细胞和细胞因子参与的慢性气道炎症[3]。

　　IL17是1993年首次从一种激活的T细胞杂交瘤中分离克隆出来，也称细胞毒性T淋巴细胞抗原8(Cytotoxic T Lymphocyte Associated Antigen 8，CTLA8)[4]，主要是由Th17细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞等多种细胞分泌的一种前炎性细胞因子。现已发现的IL17家族有IL17A～F共6种，通常所说的IL17是指IL17A。IL17表达水平普遍较低，T细胞活化后可大量表达，具有很强的致炎性。

　　贵阳医学院学报 35卷 2期饶璐飞等 哮喘患儿血清白细胞介素17水平测定　　IL17具有强大的招募中性粒细胞的作用，可促进多种细胞合成并释放多种趋化因子与炎性因子，能促进T细胞增殖，可与多种细胞因子产生协同作用以放大炎症反应。IL17强大的招募中性粒细胞的独特之处及促进多种细胞因子释放的作用，被认为参与了机体多种炎症性疾病的发生，其能诱导和激活中性粒细胞在呼吸道的募集，参与呼吸道的炎症，在呼吸系统炎症性疾病的发生发展中起重要作用。研究发现，哮喘患者的痰、BALF和外周血中的IL17含量和表达IL17的细胞数均明显高于正常人群，并且与嗜酸性粒细胞数量增加密切相关;进一步还发现，除T细胞表达IL17外，痰、BALF和外周血中嗜酸性粒细胞也可表达IL17[5]。卵清蛋白(OVA)致敏的过敏性哮喘小鼠模型在吸入OVA喷雾剂后，在炎症反应的肺组织中早期就有IL17mRNA的表达，并伴随着支气管内中性粒细胞的募集，表明吸入过敏原可诱导IL17在呼吸道的表达，IL17在过敏原诱导的T细胞激活与中性粒细胞募集过程中发挥了中介作用[6]。沈峰等[7，8]也发现哮喘大鼠肺组织匀浆、BALF及哮喘急性发作期患者诱导痰中IL17水平均明显升高，与Molet等[5]的研究结果一致。

　　本实验的结果显示，哮喘患儿血清IL17的水平较正常对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)，与国内外文献研究结果一致[5，9，10]，说明IL17参与了哮喘的病理生理过程。据此推测，哮喘患儿IL17升高的原因主要有以下两方面。CD4+T淋巴细胞在哮喘的发病机制中起重要作用，Th17细胞是CD4+T淋巴细胞的一种类型，而Th17细胞正是分泌IL17的主要细胞来源;嗜酸性粒细胞在哮喘的发病机制中也起重要作用，且已有实验证实嗜酸性粒细胞也可分泌IL17[5，11]。IL17是T细胞诱导的炎症反应的早期启动因素，对中性粒细胞有强大的化学趋化作用，它能增加中性粒细胞趋化因子CXC在人气道上皮和血管内皮的释放，能激活CXC表达的启动转录因子NKKB，可以显著增加呼吸道内中性粒细胞募集、活化，从而加重哮喘的急性发作。另外，IL17还可以激活成纤维细胞和巨噬细胞释放TNFα、PGE2、IL6、IL8、IL11等，这些细胞因子能增强炎症反应，并参与哮喘呼吸道的重塑。

　　综上所述，哮喘是一个复杂的免疫性疾病，众多的细胞因子和炎症介质参与了其发病过程。本研究结果显示，哮喘急性发作期患儿血清中IL17水平升高，表明其在哮喘的发病过程中起了重要作用，参与了哮喘炎症发病，但其确切机制尚不明确，针对IL17的深入研究，有望为哮喘发病机制的进一步探讨和防治提供新的思路。

　　【参考文献】

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