小儿喘息性疾病患者血清sCD86及IgE水平

　　作者：朱晓萍1, 余漪漪1, 费 樱2, 余 芳2 作者单位：(1.贵阳医学院附院 儿科， 贵州 贵阳 550004， 2.贵阳医学院附院 免疫室， 贵州 贵阳 550004)

　　【摘要】 目的： 了解血清可溶性CD86(soluble CD86,sCD86)、总IgE(total immunoglobulin E, tIgE) 及特异性IgE (specific immunoglobulin E,sIgE)在喘息性疾病中的表达，为临床治疗喘息性疾病提供理论依据。方法： 采用ELISA法检测54例喘息性疾病与20例健康对照血清sCD86及tIgE水平，采用欧蒙印迹法检测45例喘息性疾病与17例健康对照血清变应原sIgE。结果： 喘息性疾病组sCD86比对照组明显升高(P﹤0.001),毛细支气管炎、喘息性支气管炎、支气管哮喘三组之间无显著性差异(P>0.05) ;喘息性疾病组tIgE比对照组明显升高(P<0.001)，tIgE升高率也明显升高(P﹤0.01) ;喘息性疾病组变应原以sIgE的阳性率明显高于对照组 (P<0.05) ;喘息性疾病吸入性变应原sIgE以屋尘、尘螨组合最多见，食物性变应原以淡水鱼最常见;tIgE和sIgE有较好的相关性(P>0.05);喘息性疾病血清sCD86的浓度与tIgE未显相关性(P>0.05)，喘息性疾病变应原sIgE阳性组与sIgE阴性组sCD86的浓度无显著性差异(P>0.05)。结论： sCD86在喘息性疾病发病中有一定的作用，小儿喘息性疾病与Ⅰ型变态反应关系密切。

　　【关键词】 小儿喘息性疾病; 可溶性CD86; 总IgE; 特异性IgE变应原

　　A Preliminary Study on Serum Levels of sCD86 and

　　IgE of Children with Wheezy Diseases

　　ZHU Xiaoping1, YU Yiyi1, FEI Ying2, YU Fang2

　　(1.Department of Pediatrics, The Affiliated Hospital of Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China;

　　2.Laboratory of Immunology, The Affiliated Hospital of Guiyang Medical College, Guiyang 550004，Guizhou, China)

　　[Abstract] Objective: To explore the role of serum soluble CD86 (sCD86), total immunoglobulin E (tIgE) and specific immunoglobulin E (sIgE) in immune pathogenesis of wheezy diseases in children. Methods： Serum sCD86 and tIgE of 54 children with wheezy diseased(group D1) and 20 healthy children (group C1) were tested with ELISA method, and sIgE of 45 wheezy disease cases (group D2) and 17 healthy children (group C2) were determined with EUROLINE method. Results： Serum sCD86 and tIgE levels of group D1 were higher than those of group C1 significantly (P﹤0.001) , but there was no significant difference among three types of wheezy diseases (P>0.05). The increase rate of tIgE of group D1 was much higher than that of group C1 (P﹤0.01). The positive rate of sIgE in group D2 was much higher than that of group C2 (P<0.05). The inhalant allergen serum sIgE of wheezy disease patients was mainly house dust and dust mite mix; Food allergen was usually fresh water fish. There was a positive correlation between tIgE and sIgE levels (P>0.05), while no correlation was found between the concentrations of serum sCD86 and tIgE in wheezy disease patients (P>0.05). There was no difference of sCD86 between sIgEpositive and sIgEnegative cases of wheezy disease(P>0.05). Conclusions： sCD86 plays an important role in development of wheezy diseases in children. There is a close relationship of wheezy diseases of children to type I allergy.

　　[Key words] wheezy disease; soluble CD86;total immunoglobulin E;specific immunoglobulin E; allergens

　　小儿喘息性疾病是指一组具有喘息症状的呼吸道综合征,主要包括毛细支气管炎、喘息性支气管炎和支气管哮喘[1]。毛细支气管炎是婴儿较常见的下呼吸道感染性疾病，首次发作后约30%～40%的患儿发展为哮喘;喘息性支气管炎是婴幼儿期一种特殊类型的支气管炎，临床表现与哮喘相似，部分患儿数年以后发展为哮喘;支气管哮喘是儿童常见的慢性病，是由于嗜酸性细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的气道慢性炎症，其患病率有逐年上升的趋势[2]。支气管哮喘的病因涉及遗传、环境、免疫等诸多因素，积极寻找和避免接触过敏原是防治支气管哮喘的有效方法。可溶性CD86(soluble CD86,sCD86)在支气管哮喘的免疫发病作用引起了广泛关注[3，4]。本研究检测喘息性疾病血清中sCD86，总IgE(total immunoglobulin E,tIgE) 及特异性IgE (specific immunoglobulin E,sIgE)水平,了解它们在喘息性疾病中的表达及相关性，进一步探讨喘息性疾病的免疫学发病机制，为临床治疗喘息性疾病提供一定的理论依据。

　　1 对象和方法

　　1.1 研究对象

　　2007年8月～12月诊断为毛细支气管炎18人、喘息性支气管炎18人、支气管哮喘18人，其中男28人，女26人，年龄0.25～7.5岁,平均(2.62±2.16)岁。以上疾病的诊断标准参照文献[5],排除由于心脏疾病、异物吸入及先天性气道发育畸形等引起的喘息，标本于急性发作期采集，患儿4周内均未用糖皮质激素、免疫调节剂及抗组胺药。对照组为健康体检儿童20人，男11人，女9人，年龄0.75～7.0岁,平均(3.60±1.58)岁，排除近期呼吸系统感染，无个人和家族过敏性疾病及其他变态反应性疾病史，无慢性心肝肾疾病史。喘息性疾病组和对照组的年龄、性别资料经统计学处理差异无显著性。

　　1.2 标本采集及检测

　　所有研究对象抽取静脉血3 ml置于不抗凝的无菌试管中，收集血清，置于-40 ℃冰箱保存备检。采用酶联免疫吸附法测定54例喘息性疾病及20例对照血清sCD86水平(法国DIACLONE公司)和tIgE水平(德国欧蒙公司); 采用欧蒙印迹法(德国欧蒙公司)测定45例喘息性疾病及17例对照血清变应原sIgE水平。

　　1.3 统计学处理

　　应用SPSS 11.5统计软件包进行处理，所有计量资料进行正态性及方差齐性检验，正态分布的数据用(x±s)表示，偏态分布数据用中位数与四分位数间距表示，比较前经变量转换为正态，两组均数之间的比较用t检验或t′检验，三组均数之间的比较用q检验或Tamhane′s T2检验，计数资料之间的比较用卡方检验，两因素之间的相关分析采用直线相关方法，检验水准ɑ定为0.05，P<0.05有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 血清sCD86水平

　　喘息性疾病组与对照组相比明显升高，差异有显著性 (t=4.652，P﹤0.001) ;毛细支气管炎、喘息性支气管炎、支气管哮喘血清sCD86水平无显著性差异(F=2.115,P>0.05),见表1。表1 血清sCD86的水平 　(1)与对照组比较，P﹤0.001;(2)组间两两比较,P>0.05。

　　2.2 血清tIgE水平及升高率

　　喘息性疾病组tIgE与对照组相比明显升高，差异具有显著性(t=5.122,P<0.001)。以对照组tIgE均数加2个标准差，即75.41 IU/ml为准，高于75.41IU/ml者视为升高，反之视为正常来统计tIgE的升高率。喘息性疾病组tIgE的升高率与对照组相比明显升高，差异有显著性 (χ2=12.341,P﹤0.01)，见表2。表2 两组血清tIgE水平及升高率比较(1)以均数与四分位数间距表示，与对照组比较,P<0.001;(2)与对照组比较,P<0.01。

　　2.3 血清sIgE

　　2.3.1 血清变应原sIgE检出强度 每条膜包被20种抗原，喘息性疾病组45例共有900个抗原次数，对照组17例有340个抗原次数。经χ2检验喘息性疾病组变应原sIgE阳性率明显高于对照组(χ2=25.839，P<0.05)，见表3。表3 血清变应原sIgE的检出情况(抗原次数)

　　2.3.2 血清变应原sIgE分布 喘息性疾病吸入性变应原sIgE以屋尘和尘螨组合最多见，食物性变应原以淡水鱼最常见。其中，对两种变应原同时过敏者有5人，对3种变应原同时过敏者有6人，对4种变应原同时过敏者6人，对5种变应原同时过敏者有3人，见表4。表4 喘息性疾病变应原sIgE阳性检测结果(抗原次数)

　　2.4 喘息性疾病tIgE与sIgE的相关性

　　通过χ2检验得出两者的阳性检出率无明显的差异(χ2=0.444，P>0.05),见表5。

　　2.5 喘息性疾病sCD86水平与IgE的相关性

　　喘息性疾病sCD86水平与tIgE无明显相关性(r=-0.254,P>0.05)，喘息性疾病变应原sIgE阳性组与sIgE阴性组sCD86水平之间亦无明显差异(t=0.397, P>0.05)。　表5 喘息性疾病tIgE与sIgE检出结果比较(n,%)

　　3 讨论

　　小儿喘息性疾病是儿科最常见的小气道疾病之一，主要指毛细支气管炎、喘息性支气管炎、支气管哮喘，三者关系密切，可能是一种疾病的三个不同的发展阶段，也可能是三种不同的疾病，有截然不同的预后。喘息性疾病的病因、转归、治疗是目前研究的热点之一[6]。随着对喘息性疾病发病机制的深入研究，血清sCD86水平逐渐引起了人们的关注，尤其是支气管哮喘与sCD86的关系。CD86 与CD28结合后使免疫应答向Th2 方向分化，CD86共刺激信号途径在支气管哮喘气道高反应性和气道炎症的发展中有重要作用，支气管哮喘患儿抗原呈递细胞表面CD86的表达增高与血清中IgE的浓度显著正相关[7]。变应性疾病变应原特异性的T淋巴细胞的繁殖和细胞因子的产生都需要CD28和CD86的共刺激作用[8]。血清sCD86的来源不是很清楚，较多学者认为其来源于外周血单核细胞[4]。有研究证实，支气管哮喘急性发作患儿血清中sCD86水平较缓解期和健康对照者明显增高，而且其浓度反映疾病的严重性[9]。另有研究证实，血清sCD86的浓度和一些临床参数具有一定的相关性，如外周血的嗜酸细胞、淋巴细胞、单核细胞计数，血浆中ECP浓度及气道高反应性等[10]。本研究结果显示，喘息性疾病组血清sCD86的水平较正常组明显升高，差异有统计学意义。血清sCD86在喘息性疾病组内毛细支气管炎、喘息性支气管炎、支气管哮喘三个组均升高，两两比较未显示有差异性，这提示sCD86升高不仅出现在支气管哮喘，也可出现在毛细支气管炎和喘息性支气管炎中，因此，sCD86可能在喘息性疾病发病过程中起较重要作用。

　　有研究证实气道高反应性与血清中高水平的tIgE 密切相关，持久的高IgE血症是引起反复喘息的重要原因[11]。喘息首发年龄越迟、血清tIgE浓度越高、喘息越易反复发作，喘息反复发作患儿血清IgE浓度高于喘息未反复发作者。从本研究结果看，喘息性疾病组较对照组tIgE明显升高，差异有显著性，且喘息性疾病血清tIgE的升高率增加,由此可见喘息性疾病与IgE关系密切，与姚欢银等[12，13]的研究一致，因此，检测IgE浓度可作为预测小儿喘息性疾病发生及预后的指标之一。本实验的结果提示，喘息性疾病组变应原sIgE的阳性率与对照组相比明显升高，差异有显著性。喘息性疾病患儿吸入性变应原以屋尘、尘螨组合最多见，猫毛、狗上皮也是重要的吸入性变应原，所有标本未出现花粉过敏,可能与收集病例的时间集中在秋冬季节有关。喘息性疾病食物性变应原以淡水鱼最常见，鸡蛋、牛奶sIgE阳性仅出现在毛细支气管炎组，患儿年龄均在1岁以内，因此鸡蛋、牛奶是小于1岁患儿主要的过敏原，这与张晓波等[14]研究结果一致。研究结果说明，由于环境污染加重、生活水平提高、宠物饲养增多，特应性患儿接触致敏原的机会增多，容易导致或加重喘息的发作。特异性变应原检测是过敏性疾病诊断的必要手段，尽早查出过敏原,避免接触过敏原或进行特异性治疗可能有助于减轻或阻断其进展。

　　喘息性疾病的发展和转归趋势与个体的特应性有密切关系，在生命早期发生变应原致敏是进展至持续哮喘的危险因素[15]。早期检测血清tIgE和sIgE，对喘息性疾病患儿进行特应性评价以了解病情、行早期干预及评估预后有重要指导意义。本文研究结果显示,喘息性疾病血清tIgE和sIgE有较好的相关性, 但tIgE升高而sIgE阴性者,可能由于患儿特异性抗原种类未包含在所检查的范围中; sIgE阳性而tIgE不高说明患儿对某种抗原过敏,但其水平还不足以引起tIgE升高，因此，两者联合检测可提高阳性率和更好地了解患儿的特应性情况。本研究显示喘息性疾病患儿血清sCD86浓度与tIgE无相关性，这与文献报道一致[10]。有研究证实支气管哮喘患儿B细胞表达CD86的百分率与血浆总IgE水平呈显著正相关[16],这与本研究的结果不相符，可能因为sCD86的游离形式可选择与不同受体结合，包括CD28, CTLA4等，也可能还有其他的一些受体,影响了sCD86在血中的浓度，从而导致血清中sCD86的浓度与IgE无相关性。这方面的问题值得进一步探讨。

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