四价流感疫苗预防季节性流感的研究

本综述介绍近期国外国内季节性流感流行情况，说明为什么需要在三价疫苗中增加另一个谱系B型病毒抗原组成四价流感疫苗，重点是在近几年流感流行季节中有关B型流感病毒和B型病毒二个谱系分布和流行的情况，以及四价流感疫苗研发的临床进展及注册批准的新产品。　　近年国内外监测的季节性流感流行病学情况在每个流行季节中除外二种A型流感病毒外，B型流感病毒占多大比例呢，根据来自美国CDC数据，从2001-2002年到2009-2010年10个流行季节，由参与监测的实验室上报的流感阳性标本中，B型流感占0.1%-44%，平均为24%。欧洲监测数据来自相同流行季节，B型流感占1%r一60，平均为23%更多的问题是在1985年后在全球流行的原单一谱系B型流感病毒B/Yamagata，逐渐演变为二种抗原性截然不同的B/}一ictoria和B/Yamagata二个谱系交替或者一个谱系为主的混合流行这二个谱系B型病毒之间很少或者没有交叉保护2}CHO每年推荐生产三价疫苗中只有一个谱系的B型病毒预热在下一个流行季节流行谱系的B型流感病毒人选制备新的疫苗就意味着对B型病毒好的保护依赖了对流行季节准确预侧流行的谱系。根据2001-2002年到2010-2011年Il个流行季节，只有6次占主要流行的B型流感谱系被制备疫苗选中3川。即使在选对占主要流行B型流感谱系株在其流行季节，另一个谱系病毒也显示相当高的发病率，在美国和欧盟分别可达26%和440Io}3}。美国从2001-2002年至2010-2011年共10个流行季节，估计46%的B型流感病例没有被疫苗保护。欧盟从2003-2004年至2010-2011年共8个流行季节，估计58%的B型流感病例没有被疫苗保护特别应注意的是B型流感引起的疾病主要在儿童，尤其是幼儿和学龄儿童，多于其他人群。结果是流感疫苗的接种在预防B型流感流行仅起有限作用。美国CDC报告有关儿童因流感死亡病例中2004-2011年6个流行季节中确诊由B型流感病毒引起的百分比为21.2%-44.3%，平均占34.2%。　　2011-2012流感流行季节美国CDC在第20周报告，从2011年10月2日起累计22200例流感病例其中19162为A型流感，占86.3%;B型流感3038例，占13.7%。对1816例病毒进行抗原分析，其中302例为B型病毒，147例为B/Victoria谱系占48.7%和155例为B/Yamagata谱系占51.3%oWHO/欧盟第20周报告，从2011年10月起累计检测10983例流感，9586例为A型占87.3%;1397例为B型流感占1207%。并对2001例流感病毒抗原分析，其中B型458例，由353例占77.1%的B/Victoria谱系和105例占22.9%的B/Yamagata谱系组成。　　2012-2013流感流行季节美国CDC在2013年4月13日第15周最新报告，从2012年10月以来从积累的71006例流感阳性，A型50953例71.8%;其中20052例B型流感占流感阳性样本的28.2%。如果按周观察B型病毒检出率呈上升趋势。对2144例流感病毒抗原分析，其中735例为B型病毒。在B型流感病毒中B/Victoria谱系占32.8%,B/Yamagata谱系占67.2%}WHO/欧盟在2013年4月26日第16周最新报告，从2012年第40周起共收集93840例流感病毒，确定其中34785例为B型病毒占37%。对来自17个国家的5264例病毒进行抗原分析，其中2452例为B型病毒。　　在B型流感病毒中B/Victoria谱系占13.3%,B/Yamagata谱系占86.7%o2010年10月WHO正式通知，任命中国国家流感中心为全球第五家、为发展中国家首家全球流感参比和研究合作中心，我国承担更大的职责和义务，逐年提供愈来愈多的资料。对流感的监测和预防、疫苗应用、甚至对研制新的流感疫苗提供依据。中国流感中心报告自2012年1月2日起至12月30日收到甲型H1N1流感病毒株116株、季节性流感病毒株16178株。在中国季节性流感中B型流感病毒占多少百分比?B型中不同基因特性的谱系又各占多少百分比?　　根据2012年中国流感监测周报第43周，报告2011年10月2日至2012年10月28日，对2011-2012年流行季节各型流感病毒8168株进行抗原性分析:其中2903株A型流感病毒占全部病毒株总数的35.5%;5265株B型流感病毒占64.5%。并对占总数超过一半的B型流感病毒进行基因特性分析:3418株B/Victoria谱系，占B型流感病毒的64.9%;1847株B/Yamagata谱系，占B型流感病毒的35.1%o2012年中国流感监测周报第48周，报告2012年4月2日至2012年12月2日期间，其中2012年9月后采集样品应归属于2012-2013年流行季节，对各型流感病毒2417株进行抗原性分析:其中A型流感病毒共2026株，占83.8%o对占流感病毒总数16.2%的391株B型流感病毒进行基因特性分析:303株是B/Victoria谱系占77.5%,88株是B/Yamagata谱系占22.5%o同年第52周报告，2012年10月1日至2012年12月30日(以采样日期统计)属于2012-2013年流行季节的336株各型流感病毒进行抗原性分析:A型流感病毒占各型流感病毒总数的72.0%。对占总数28%的94株B型流感病毒进行基因特性分析:占全部B型病毒的92.5%的B/Victoria谱系流感病毒有84株;B/Yamagata谱系7株，占B型病毒的7.5%。　　资料所示2009-2010年、2010-2011年和2011-2012年，这三个流行季节WHO都推荐B/Victoria谱系病毒参与制备三价季节性流感疫苗。从美国CDC和WHO/欧盟的报告中都支持在2009-2010年、2010-2011年二个流行季节中，选择B/Victoria谱系病毒制备疫苗是正确的，因为在美洲和欧洲B/Victoria谱系病毒的流行是占绝对优势，2009-2010年流行季节分别为84%和94%;2010-2011年流行季节分别为94%和92%}'}。从2011-2012年流行季节情况变得复杂起来，WHO/欧盟的报告支持WHO对B型流感谱系流行的预测B/Victoria谱系占检出B型病毒中占优势为77.1%。美国CDC报告中则不支持，该季B型谱系抗原分析占微弱优势的是B/Yamagata占51.3%。从中国国家流感中心的2012年中国流感监测周报第43周报告中的结果，送检的B型流感病毒超过A型病毒占全部病毒样品的64.5%。对B型流感病毒进行基因特性分析，B/Victoria谱系占B型流感病毒的64.9%;没有疫苗保护的B/Yamagata谱系占35.1%，支持WHO对2011-2012年流行季节B型流感谱系流行的预测，但B/Yamagata谱系抗原检出相当高。在中国台湾地区进行流感病毒抗原分析不支持WHO的预测，从2011年7月到2012年6月，329株B型流感病毒其中287株占87.2%是属于B/Yamagata谱系。　　美国CDC2013年第15周和WHO/欧盟2013年第16周报告是支持2012-2013年流行季节中预测B/Yamagata谱系是主要流行株，分别占B型流感67.2%和86.7%，但我国流感中心在2012-2013年流行季节2012年中国流感监测周报第48周报告2012年4月2日至2012年12月2日期间和第52周报告2012年10月I日至2012年12月30日期间，统计按以采样日期，日期互有交叉，但积累的数据却支持在中国2012-2013年流行季节是B/Victoria谱系流感病毒占优势，与在美洲和欧洲的流行相反，分别高达77.5%和92.5%;2012-2013年流行季节在推荐的三价季节性流感疫苗主要预防流行的B型流感病毒B/Yamagata谱系，仅占22.5%和7.5%。当然，对新的这一季有待更多流行病调查数据证实。　　2需要四价流感疫苗的理由　　根据2001-2002年到2010-2011年11个流行季节，只有6次占主要流行的B型流感谱系反亏_备是百忿二上述资料亦显示2011-2012年和2011在美洲、欧盟和亚洲地区对B型的不同涪票劲是以预测。对于没有选择对占主要流行盯El污李晋三二_行季节的三价季节性疫苗，保护人群预防-使疫苗选择了流行的B型流感谱系，十多浮云序全括果，也有相当数量人群受另一谱系B型病毒亨用的三价疫苗只含一个谱系的B型流感病豪孔五育卜万几疫人群而言，对没有在包括在疫苗内的另一借提供有限保护。多年来，科学界和生物亏.吕灵葺一全和积极建议增加另一谱系的B型流感病毒至感疫苗中，制备包括二株A型和二株不同谱系井三几砚亨病毒的四价流感疫苗〔3,6]。这将是更安全和有谈鱿于井圣节性流感，特别是对幼儿和学龄儿童的保护，提喜畏百一群的保护能力。这就是研制新的四价流感疫苗。　　3四价流感疫苗的安全性和免疫原性需要证实任何四价流感疫苗都需要证实其安全性和免妥万住包括来自不同培养方式，如鸡胚或细胞;不同的抗原形三丁流感病毒裂解疫苗、减毒活疫苗和病毒样颗粒疫苗等;几不同的投药途径等。例如，目前市壕上供应量最大的病毒裂解疫苗己使用多年，其安全性和免疫原性是瓦一二认可的。四价流感病毒裂解疫苗的研制，只是在推荐盯三疫苗的基本抗原上再增加一份另一谱系的B型流感获百使用推荐的疫苗病毒株，按WHO的生物制品规程要不二制。原来每0.5剂量中三种血凝集抗原总重45wg增至二种血凝集抗原总重为6owg。在实验室研制和临床试验见反中，需要考虑的是随抗原种类和总量增加，新增加的找万气原有抗原有无拮抗作用，是否影响相关抗体的产生。特三_是在临床试验观察中还应该考虑到疫苗的安全性是否压于获原种类和总量的增加，在不良反应方面，会加重局部称兰异的反应。其他不同培养方式、不同形式的活疫苗、病毒二奢粒疫苗和不同投药途径都同样的道理来考虑。　　4国外四价流感疫苗研发的临床进展和注册批准的产吕2012年2月美国FDA注册批准的第一个是比传统三于途径更安全的投药方式的鼻腔喷雾四价流感疫苗，比轰三FIuMist,MedImmune疫苗公司研制，名为F1uMis=Quadrivalent，使用对象是2-49岁的人群。该疫苗为1}-_-_毒疫苗，含有二种A型流感和二种B型的不同谱系流感三毒(B/V1CtOPla/2/t}7谱系和B/}amagata/16/88谱系)二哥疫苗与F1uMist三价疫苗比较其安全性和有效性，在美亘二次新的临床试验，包括4000名J匕童和成人，结果支持匹，于三价疫苗免疫反应相似，不良反应也相似。普遍报告的丁灵反应是流鼻涕和鼻塞[8〕。　　2012年12月17日葛兰素史克公司(GlaxoSmithh--宣布当年7月20日美国FD_1批准四价流感疫苗Fluar:-::用于3岁以上儿童和成人的A型和B型流感的预防。该疫苗是覆盖4种流感病毒株(二种A型流感和二种B型)的裂解病毒的肌注疫苗。资料介绍在该疫苗的临床试验中证实其安全性。无论在儿童组、或者在成人观察组中，与三价疫苗相比，局部和全身反应的发生率相似。免疫原性试验在儿童组和成人组都被证实，四价疫苗中所含与三价疫苗相同的抗原在各观察组中都产生相似的免疫反应，新增加的病毒抗原同样刺激受试者产生相应的抗体，符合流感疫苗标准。　　美国Novavax公司进行四价季节性流感病毒样颗粒(vLP)疫苗的研制，于2012年7月24日宣布已经完成I期和II期临床试验。结果证明该病毒样颗粒(VLP)疫苗的安全性及其三种递增剂量的免疫原性。免后21d的血清中检出对四种病毒株的血凝抑制抗体，并无与疫苗相关的严重不良反应。<65岁的成人中，接种该疫苗后的血清阳转率和保护力分别为>40%和>70%,SanofiPasteur公司2012年5月在波斯顿儿科科学年会上报告四价流感疫苗在4300名6个月到8岁儿童中第l期临床观察结果。并与近期批准的三价疫苗Fluaone相比较，证实四价疫苗的安全性和免疫原性。最近的Vaccine杂志发表四价灭活流感疫苗与注册批准的三价灭活流感疫苗在成人中安全性和免疫原性进行比较的结果[y1所使用的疫苗由SanofiPasteur(Swiftwater.Pa.USA)公司生产，每0.5。]齐!J量中含有二株A型流感病毒A/Brisbane/59/2007(H1N1)和A/Uruguay/716/2007(H3N2;anA/Bribane/10/2007一类似株)的血凝素各巧d.g<>差别在于日型，四价疫苗含有B/Bribane/60/2008(Victoria谱系)和B/Florida/04/2006(Yamagata谱系)，三价疫苗有B/Brisbane/60/2008(Victoria谱系)或者含有B/h'lorida/04/2006(Yamagata谱系)流感病毒的血凝素15}g。在18岁以上成人中，分三组进行第11期临床试验，每组190名受试者，免疫后21天收集血清测定血凝抑制抗体。血清保护率和血清阳转率在三组中结果相似，疫苗接种后其全身和局部反应也相似。结论是含有二株B型流感病毒的四价疫苗的安全性和免疫原性象三价疫苗一样，可使用四价疫苗取代二价疫苗，同时保护人群抵抗二株不同谱系的B型病毒。　　另外，2012年11月20日美国FDA批准Novartis公司研制的细胞培养技术生产的三价季节性流感疫苗Flucelvax,该疫苗含有纯化的病毒外膜蛋白、血凝素和神经氨酸酶，接种对象为18岁以上的人群。生产Flucelvax的病毒是生长在哺乳动物细胞一狗肾细胞MDCK(madin-darbycaninekidney)。这说明细胞培养已经是作为取代现在鸡胚培养流感病毒的一种选择。象Novarti，这样全球性、有实力的生物公司在现有的三价流感疫苗Flucelvax的基础上增加另外一系H型流感病毒抗原研制四价疫苗也是顺理成章之事。　　江苏金迪克生物技术有限公司和北京金迪克生物技术研究所已经完成了四价流感病毒裂解疫苗的实验室研究，并向国家食品药品监督管理局药品审评中心提交注册申请。　　5参考文献　　Notomi 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