结核分枝杆菌TB—SA抗体检测技术应用指导意见（试行）

一、背景

及时、快速、准确地诊断结核病.特别是痰菌阴性肺结核患者以及潜伏感染者的识别是目前结核病诊断面临的重大挑战之一。

免疫学方法是诊断许多感染性疾病的经典方法，具有技术成熟.操作简便、时间短，可以高通量对大规模样本进行快速检测等优点，国际和国内也不乏使用该方法检测结核病的报道

2008年世界卫生组织对国际市场上已经使用的19种结核病血清抗体检测试剂进行了临床研究，结果发现所有试剂盒诊断肺结核患者的敏感度都比较低，仅为0.97%~59.7%·特异度为60%左右由于诊断结核病的结果不理想.因此世界卫生组织不提倡将此类方法用于结核病的检测

二、结核分枝杆菌TB-SA抗体检测技术的特点

结核分枝杆菌TPrSA抗体检测技术.采用体外表达纯化的结核分枝杆菌TB-SA蛋白抗原.应用酶联免疫法检测血清标本中特异的TB-SA抗体该方法操作简单、安全性高、通量大.已获得国际、国内多项专利及技术保护。

TB-SA抗体检测试剂盒的关键技术是TB-SA抗原·该抗原是历经了9年筛选出来的抗原，是结核分枝杆菌血清诊断的理想抗原，具有以下3个特点全:

1.TB-SA仅存在于结核分枝杆菌和与其紧密相关的致病性分枝杆菌中，包括:牛结核分枝杆菌、鸟一胞内分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、副结核分枝杆菌，不存在于环境中非致病分枝杆菌，如耻垢分枝杆菌、龟分枝杆菌和任何其他细菌、真菌、病毒等微生物中。因此特异度高.有别于国内、外现有的结核抗体检测试剂盒普遍采用的，在多数非致病的分枝杆菌.如耻垢分枝杆菌、龟分枝杆菌中普遍存在的38 kD蛋白抗原.ESAT-6/CFP-10蛋白抗原，或细胞壁LAlVI糖脂抗原

2.只有当结核分枝杆菌侵人人体巨噬细胞内并持续生长时.才发生TB-S.}1基因的表达.其编码蛋白合成是结核分枝杆菌的重要毒力因子。此特点能有效排除人体已接种过卡介苗对TB-SA检测结果产生的影响。

3.TB-SA抗原蛋白是一种分泌性蛋白，容易被机体识别并引起免疫应答从而产生特异性抗体。

三、多中心评估结果

鉴于结核分枝杆菌TB-SA抗体检测技术的优势}37_2012年中国防痔协会接受了“成都赛普克生物科技股份有限公司”的委托，组织了由天津、河南和山东三省(市)结核病防治机构参与的，历时1年之久的多中心临床对照研究。

研究结果显示:TB-SA抗体检测法检测755例确诊结核病患者(包括菌阳和菌阴活动性结核病患者)的敏感度为74.800.高于涂片(25.600)和培养(39.600);其中对菌阳结核病患者的敏感度为88.500，对菌阴活动性结核病患者的敏感度为68.000，阳性预测值为92.300(图1)0经平行分析，TB-SA抗体对非结核病患者及健康人群的特异度远高于PPD皮肤试验，且与PPD皮肤试验结果无统计学相关性，不受人体接种卡介苗的影响(图2)o研究结论:TI3-SA抗体检测法在菌阳结核病患者中的敏感度为88.50a，在菌阴活动性结核病患者中的敏感度为68.000，阳性预测值为92.30a，表明该试剂诊断结核病的可信度高，特别是有助于菌阴结核病的诊断。

TB-sA抗体检测试剂盒在健康人群中的检测特异度为97.300。在受检的非结核病人群(包括健康人和非结核其他肺部疾病患者)中特异度达到84.2%，提示其对于结核病与其他疾病的鉴别诊断有一定意义，可用于重点人群结核病筛查。由于人群遗传多样性的存在和本研究样本量所限，需要在大规模人群中进一步验证。

四、应用指导意见

1.菌阴结核病患者辅助诊断:鉴于目前研究数据提示，Tl3-SA抗体检测试剂诊断菌阴结核病有较好的敏感度和特异度。具体使用建议:初诊疑似患者如细菌性检查为阴性后，可以进行TB-SA抗体检测，作为辅助诊断的参考依据之

一.如果TB-SA抗体检测阳性，抗炎治疗效果不明显，则可以诊断为疑似结核病;如果TB-SA抗体检测阳性，抗炎治疗效果明显，则为假阳性如果TB-SA抗体检测阴性，抗炎治疗效果不明显，需要另行其他检测。

2.结核病筛查:鉴于TF3-SA抗体检测技术的敏感度为7-8，操作简便，安全性好，建议可以考虑用于人群中结核病的筛查(1)学生:当学校有疫情暴发.可首先对所有密切接触者开展TB-S.S抗体检测筛查，对阳性筛查对象再查X线胸片、涂片和培养等检查。<2)老年人，流动人口，从事结核病防治的医疗卫生人员，食品、药品、化妆品及《公共场所巨生管理条例》中规定的从业人员，接触粉尘或者有害气体的人员，乳牛饲养业从业人员，和其他易使肺结核扩散的人群:可先开展TB-SA抗体检测筛查，对阳性筛查对象再查X线胸片、涂片和培养等相关检查

3.鉴定结核潜伏感染:TB-S.S是致病性结核分枝杆菌侵人机体免疫细胞后产生的特异性抗原，可以有效排除卡介苗接种引起的假阳性，因而TB-SA抗体检测可作为检测结核潜伏感染的方法之一。健康人群体检中.如果检查结果呈阳性，提示可能已经感染致病结核分枝杆菌并且已经或者可能发展成活动性结核病患者.需进行其他相关检查.减少发病和(或)降低在人群中扩散的风险。

专利及相关证书:

1.2006年该产品获得国家一类新药证书(证朽号:国药证宇S20060032);

2.2011年该技术获得成都市科技进步奖一等奖厂文件号:成府发(2012)38号];

3.2006年获得南非国家专利证书(专利号2005/03423);

4.2007年获得英国国家专利证书(专利号:UB2408982);

5.2010年获得中国国家专利证书(专利号;ZL2003 8 0100130.2);

6.2011年国家发改委将该项目列人国家高技术产业化示范工程(2011-06-07)

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