多项指标联合检测在糖尿病早期肾损害诊断中的价值

　　作者：吴瑜霞 龚兰 陈振宇 杨秀华 杨英为

　　(广州市第一人民医院检验科，广东广州　510180)

　　【摘要】　目的　探讨联合检测尿液视黄醇结合蛋白(RBP)、ɑ1-微球蛋白(ɑ1-MG)、微量白蛋白(MA)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)和血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)在糖尿病早期肾损害诊断中的价值。方法　对68例糖尿病早期肾损害患者和30例健康人标本的尿液RBP、ɑ1-MG、MA、NAG和血清CysC进行测定，并分析单项指标及五项指标联合检测对糖尿病早期肾损害的诊断价值。结果 尿液RBP、ɑ1-MG、MA、NAG和血清CysC在糖尿病早期肾损害患者中均有不同程度增高，与正常对照比较均有显著性差异(P<0.05)，五项指标联合检测可显著提高糖尿病早期肾损害的诊断效率(92.1%)。结论 尿液RBP、ɑ1-MG、MA、NAG和血清CysC是诊断糖尿病早期肾损害的敏感指标。

　　【Abstract】　Objective To explore the significance of retinol-binding protein(RBP), ɑ1-microglobulin (MG), microalbumin(MA), N-acetyl-β-D-glucosaminidase(NAG) and cystatin C(CysC) in the diagnosis of early renal damage in diabetic nephropathy. Methods The urine levels of RBP, ɑ1-MG, MA, NAG and the serum level of CysC were determined in 30 healthy subjects and 68 patients with diabetic. Results The levels of urinary RBP , ɑ1-MG , MA , NAG and the level of serum CysC in diabetic were significantly higher than those in the control group(P<0.05). Conclusion RBP, ɑ1-MG, MA, NAG and CysC can be used in the diagnosis of early renal impairment in diabetic patients, the combined analysis of three or four of these indicators can increase the positive detection rate.It can also be used to indicate the degree of severity of renal impairment in patients with diabetic nephropathy.

　　【Key words】 Diabetic nephropathy; Retinol-binding protein; ɑ1-microglobulin; microalbumin; N-acetyl-β-D-glucosaminidase; Cystatin C

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是一种起病隐蔽、严重的累及微血管病变的糖尿病并发症之一。该病常可累及肾小管和肾小球，有学者研究表明在肾病初期可实现逆转[1]，但一旦病人出现持续清蛋白尿，病情将会无法得到有效控制甚至死亡。本研究检测68例糖尿病患者及30例正常人的尿液视黄醇结合蛋白(RBP)、ɑ1-微球蛋白(ɑ1-MG)、微量白蛋白(MA)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)和血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)，以探讨多项指标在糖尿病早期肾损害诊断中的价值。

　　1　对象和方法

　　1.1　研究对象　选择2008年08月至2009年10月期间在我院内分泌科住院的68例患者为糖尿病组，其中男38例，女30例，平均年龄49岁。糖尿病诊断按1997年美国糖尿病协会糖尿病诊断标准：有糖尿病症状，并且一天当中任何时候血浆葡萄糖浓度 ≥11.1mmol/L ，或空腹至少8h后血浆葡萄糖浓度 ≥7.0mmol/L，或OGTT 2h血糖浓度 ≥11.1mmol/L。并排除原发性及其它继发性肾小球疾病，继发性糖尿病，及其他慢性肾间质疾病。尿常规阴性，并且选择尿白蛋白排泄率 (UAER) 在 30～300 mg/24h的具有早期肾损伤的糖尿病患者。 正常对照组40例，男性另选择30例来我院体检中心健康体检者作为对照组，其中18例，女12例，平均年龄38岁。

　　1.2 仪器和方法 尿液RBP和血清CysC采用免疫透射比浊法测定，RBP检测试剂由上海北加生化试剂有限公司提供，CysC检测试剂由广东虹业抗体科技有限公司提供。NAG采用连续监测比色法测定，检测试剂由宁波美康生物科技有限公司提供，为避免随机尿测定带来的误差，同时测定尿肌酐(uCr)，结果以NAG/Cr表示，单位为U/mmol。上述指标均采用日本Olympus AU5400 全自动生化分析仪测定。

　　尿液MA和ɑ1-MG采用Beckman公司的IMMAGE全自动分析仪及原装配套免疫比浊法试剂进行测定。

　　1.3 统计学处理 检验结果用 x±s 表示，用 SPSS 13.0 统计软件进行分析。

　　2 结果

　　2.1 糖尿病组与对照组各项测定值比较 早期肾损伤糖尿病组与对照组尿液RBP、ɑ1-MG、MA、NAG和血CysC检测结果结果，由表可见糖尿病组上述指标明显高于对照组(P<0.05)。

　　2.2 各项指标阳性率的比较 将对照组尿液RBP、ɑ1-MG、MA、NAG和血CysC水平的均数加二个标准差(x+2s)作为判断异常高值的界限，分别计算出这五项指标中超过异常高值的阳性例数及百分率，结果中发现，在早期发现肾脏损害方面， 单项检测阳性率较低，但五项指标联合检测结果阳性率可达 92.1% 。

　　3　讨论

　　糖尿病肾病(DN)是T1DM患者死亡的主要原因;在T2DM，它的严重性仅次于心、脑血管病[2]。多见于病史超过10年的患者。DN大多是由于高血糖引起肾小球基底膜增厚，细胞外基质增生以及系膜扩张，而导致肾小球高滤过和蛋白尿，在DN的早期，在肾小球滤过膜受损时它表面的电荷屏障遭到破坏，白蛋白的滤出量大于近曲小管重吸收量时将会出现在尿中,表现为微量蛋白尿[3]，目前临床常用的实验室指标尤其是常规实验检测项目难以提示早期肾脏损害。本研究结果表明尿液RBP、NAG、ɑ1-MG、MA及血清CysC含量在糖尿病组均普遍呈现出异常的改变，且与正常对照组相比差异非常显著，更加值得注意的是，这一异常改变提前出现于被常规实验室检测指标评估为肾功能正常的糖尿病患者中并随着病患肾损害程度的加重而更加明显，提示这些检测指标既能比常规检测项目更早地发现肾损害又能提供肾损害程度的信息，如进行联合检测，还能相互印证，提供相关肾损害的部位及损伤范围的病理讯息。

　　RBP是一种低分子量蛋白(相对分子质量21000)，其主要由肝细胞的粗面内质网合成，穿过滑面内质网到达高尔基复合体表面，在肝内与视黄醇1∶1结合后，释放入血[4]。身体内90%的RBP与视黄醇结合，形成视黄醇-RBP复合物，10%未结合的RBP可自由经肾小球滤过而进入原尿，在近端小管被几乎全部重吸收而分解。正常情况下，RBP 在尿中稳定性较强，不容易分解，不易受PH和血压干扰，因此在正常人尿中排量极微(100μg/ L)。但在肾近曲小管损伤时，其在尿中排量明显增加，因而尿中RBP含量增加可作为早期肾近曲小管损伤的敏感性指标[5]。尿ɑ1-MG是一种低分子量糖蛋白。游离的ɑ1-MG能自由通过肾小球滤过膜，绝大部分在近曲小管被降解或重吸收。在肾小管受损时，尿中ɑ1-MG排量增高。NAG是大分子糖蛋白(分子量为130000～140000)，NAG的主要合成和贮存器官是肾脏，以近曲小管上皮细胞中含量最高，可反映近曲小管功能的改变[6]。MA是主要存在于血液中分子量为60000～90000的蛋白质，是血浆蛋白的主要成份，生理条件下出现于尿液中的量极微，当肾小球因受损而通透性增高时可渗漏到尿液中，是反映肾小球滤过膜受损的早期敏感指标。Cystatin C是一包含了120个氨基酸残基的非糖基化多肽链(相对分子质量为13kD)，它的特点是携正电荷、相对分子量小;在近曲小管被重吸收且完全代谢;能自由通过肾小球基底膜;在组织中有恒定的产生速率;肾小管无分泌;其排出仅受肾小球滤过率影响，不受饮食、性别、年龄、恶性肿瘤、炎症反应、肌肉和血脂、肝脏疾病等其它因素的干扰[7，8]。因此，血清中的Cystatin C就成为反映肾小球滤过率的一个非常好的理想指标[9]。

　　本研究检测尿液RBP、NAG、ɑ1-MG、MA和血清CysC多项指标，结果发现糖尿病组上述指标明显高于对照组(P<0.05)，且联合检测各项指标结果阳性率可达 92.1%，较单项检测阳性率高，对于诊断早期糖尿病肾病、判定肾功能损害的程度及部位均具有较高的临床价值。

　　4　参考文献

　　[1] Steinke JM, Sinaiko AR, Kramer MS, et al. The early natural of nephropathy in Type 1 diabetes: Predictors of 5 year urinary albumin excretion rate patterns in initially normoalbuminuric patients[J]. Diabetes, 2005, 54(7): 2164-2171.

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　　[3] Verhave JC, Gansevoot RT, Hillege HL, et al. An elevate urinary albumin excretion predicts de novo development of renal function impairement in the general population[J]. Kidney Int Supp, 2004, (92): S18-21.

　　[4] 刘连红，马艳华，罗建祥.高血压病早期肾损害患者尿视黄醇结合蛋白检测的临床意义[J].实用医学杂志，2010，26(7)：1177-1178.

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　　[6] 雷厉.相关肾脏早期损害指标对早期糖尿病肾病的诊断价值[J].热带医学杂志，2006，6(8)：942-943.

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　　[8] 何美霞，谭焱.2型糖尿病肾病患者血清同型半胱氨酸与尿白蛋白及胰岛素敏感性的关系[J].现代医院，2007，7(10)：27-29.

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