产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究
发表时间：2014-06-25 浏览次数：639次
对2010年10月～2013年10月在本院诊治的感染患者150例分离阴沟肠杆菌150株(同患者均提取单菌株)的AmpC酶及ESBLs 检测临床分布与药物敏感性进行分析，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料：选择2010年10月～2013年10月在本院诊治的感染患者150例分离阴沟肠杆菌150株(同患者均提取出单一菌株)，阴沟肠杆菌的菌株均经过法国梅里埃VTIEK32全自动的细菌相关鉴定系统的鉴定明确。药敏纸片的选取：亚胺培南(IMP)、头孢西丁(FOX)、头孢他啶(CAZ)、头孢呲肟(FEP)、头孢噻肟(CRO)、头孢他啶/棒酸(CDO2)、头孢曲松(CRO)、头孢噻肟/棒酸(CDO3)，药敏纸片均经过英国的Oxid企业提供。
1.2 药敏试验质量控制：药敏试验均需要对选取于卫生部门相关临床的检验中心提供的菌株进行质量控制：其中产酶型的大肠埃希菌ATCC35218、大肠埃希菌ATCC25922、阴沟肠杆菌 029M、肺炎克雷伯700603。选取的菌株符合标准鉴定率均高于 99%，且药敏试验与NCCLS规定的相关准则范围相符合[1]。
1.3 检测AmpC酶表型：AmpC酶表型的纸片选择FOX、IMP、 CRO、CDO2以及CDO3。其中检测结果的相关标准：表现出IMP 敏感，其余的纸片表现出耐药，则可以判断属于高产ESBLs以及 AmpC酶同时存在;表现出IMP、FEP敏感，但是CRO、CDO2以及CDO3表现出耐药，或抑菌环的内部出现散在的菌落，属于去阻遏的持续性高产的AmpC酶。
1.4 三维试验方法：大肠埃希菌ATCC25922涂布1.5×108的平板上放置30 μg的FOX型药敏纸片，选择无菌的刀片进行纸片边缘的5 mm位置的狭缝的放射状切割，加25 ul的待测菌株相关酶提取物，该提取物为进行反复冻融后提取的β-内酰胺酶溶液，在 35℃的孵育箱进行过夜放置，后进行结果观察。如果狭缝和抑菌环交界位置存在扩大长菌区时，由于AmpC酶已经水解周围头孢西丁，因此该情况表示AmpC酶呈现出阳性。
1.5 检测ESBLs(超广谱β-内酰胺酶)：肺炎克雷伯和大肠埃希菌的超广谱β-内酰胺酶的检测方法借鉴并选择CLSI相关标准进行确认，药敏纸片选择CTX、IMP、CAZ、CDO3和CDO2。结果判定标准：其中CDO2和CTX、CAZ、CDO3抑菌环的直径差大于5 mm时，表示ESBLs呈现出阳性;或药敏试验时，AMC的附近进行CTX、FEP、CRO、CAZ、CFP、ATM的贴放时，出现协同现象表示ESBLs呈现出阳性。
2 结果
2.1 标本机体部位分布：150株的阴沟肠杆菌中，主要的标本来源：痰和咽拭子72株(48.00%)，伤口的分泌物51株(34.00%)，血液6株(4.00%)，尿液14株(9.33%)，大便5 株(3.34%)与脓液2株(1.33%)。感染科室的临床分布：150 株的阴沟肠杆菌中，主要的临床科室分布是：呼吸内科121株(80.67%)，ICU 14株(9.34%)，神经内科11株(7.33%)，骨科为4株(2.67%)。
2.2 菌株AmpC酶及ESBLs检出情况：150株阴沟肠杆菌产AmpC 酶及ESBLs的检测，阴沟肠杆菌产ESBLs检出41株(27.33%)，阴沟肠杆菌产AmpC酶检出16株(10.67%)，AmpC酶及ESBLs同时不产检出77株(51.33%)，AmpC酶及ESBLs同时产检出16 株(10.67%)。
2.3 菌株对于常用抗菌药物耐药性的分布情况：结果显示，亚胺培南的敏感性最高，其耐药率为0%～6.3%，并且产酶的阴沟肠杆菌对于相关抗菌药物耐药性比不产酶的菌株高，详见表1。
3 讨论
本研究主要对产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布进行分析，得出伤口分泌物病菌分布较多，且主要来源于呼吸内科疾病。研究进一步证实加强阴沟肠杆菌耐性监测和合理应用抗菌药物的重要性，这对临床感染疾病具有重要指导意义[2-3]。在王正兰等研究中得出，对于阴沟肠杆菌中同时不产AmpC 酶及ESBLs检测率最高，其次是产ESBLs的检出率，进而有效分析出阴沟肠杆菌产AmpC酶及ESBLs分布的检测情况[4]。在本研究中，对患者机体提取的阴沟肠杆菌临床分布和产AmpC酶及 ESBLs检查情况进行分析，得出阴沟肠杆菌产ESBLs的检出41 株(27.33%)，阴沟肠杆菌产AmpC酶检出16株(10.67%)， AmpC酶及ESBLs同时不产的检出77株(51.33%)，AmpC酶及 ESBLs同时产检出16株(10.67%)，本研究的结果与相关阴沟肠杆菌产AmpC酶及ESBLs检查情况的临床试验研究结果相符合。本研究中， 显示亚胺培南敏感性最高， 其耐药率为 0%～6.3%，并且其中产酶的阴沟肠杆菌对于相关抗菌药物耐药性比不产酶的菌株高。关于阴沟肠杆菌高产AmpC酶及ESBLs时的抗菌药物耐药性监测的重要性和深入价值，需以后临床进一步验证和证实。综上所述，临床需要合理应用相关抗菌药物，并且需要重视对阴沟肠杆菌耐性监测，同时要合理应用碳青霉烯类药物治疗严重高产AmpC酶及ESBLs阴沟肠杆菌的感染疾病。 4 参考文献
[1] 赵德军.产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌的检测及耐药性分析 [J].国际检验医学杂志,2011,29(10):167.
[2] 石庆新.重症监护病房产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌耐药性研究[J].中华医院感染学杂志,2011,19(12):372.
[3] 王正兰.产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析[J].实用检验医师杂志,2011,25(4):532.
[4] 王凤霞.阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶基因及其流行病学研究[J].中华医院感染学杂志,2012,18(11):615. [收稿日期：2014-03-14 编校：苏建东]
