PTEN、Survivin蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿表达的相关性及临床意义

子宫内膜异位症(endometriosis，EMs)简称内异症，是指具有生长功能的子宫内膜组织(腺体和间质)出现在子宫腔被覆内膜及宫体肌层以外的其他部位。是一种比较常见的妇科良性疾病，具有增生、浸润、转移、复发的特性。该病病因不明确，治疗效果局限，容易复发。PTEN基因、Survivin基因与细胞增生有关。本研究用免疫组织化学技术检测PTEN蛋白、Survivin蛋白，并分析二者在卵巢子宫内膜异位囊肿中表达的相关性及临床意义。现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料：选取2006年～2011年昆明市第一人民医院病理科存档蜡块，病理诊断明确，所有标本均经病理学诊断复核的20例卵巢子宫内膜异位症患者为研究组，其中增生期14例，分泌期6例，平均(32.00±6.86)岁。选择同期因子宫肌瘤行全子宫切除术或非子宫内膜疾病行诊刮术、病理证实为正常子宫内膜的患者20例作为对照组，其中增生期13例，分泌期7例，平均(46.45±8.80)岁。两组病例术前未使用内固醇激素，不合并内分泌、免疫及代谢性疾病。

1.2观察指标：PTEN蛋白、Survivin蛋白在上述各组中的表达。

1.3实验试剂：即用型兔抗人PTEN单克隆抗体，即用型兔抗人Survivin单克隆抗体，二步法抗兔/鼠通用型免疫组化检测试剂盒，购自基因科技(上海)有限公司。

1.4实验方法及步骤：本实验应用回顾性研究方法，采用免疫组织化学二步法检测入选石蜡切片PTEN、Survivin表达。石蜡包埋标本，制成4μm切片。免疫组织化学染色程序按二步法试剂盒说明进行。PTEN基因蛋白阳性表达部位位于细胞浆/核，PTEN检测结果判断以细胞质出现明显棕黄色颗粒为蛋白表达阳性。Survivin基因蛋白着色主要定位在胞浆或胞膜，呈棕黄色，Survivin检测结果判断以细胞胞浆或胞膜出现明显棕黄色颗粒为蛋白表达阳性。

1.5统计学处理：采用统计学软件包SPSS16.0进行统计学分析，以P<0.05为差异有统计学意义。采用χ2检验，对频数<5的采用Fisher精确概率法检验。

2结果

PTEN、Survivin蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达无明显周期性(P>0.05)。PTEN蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿和正常子宫内膜的阳性表达率分别为70.0%、100.0%，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白在卵巢子内膜异位囊肿和正常子宫内膜的阳性表达率分别为75.0%、35.0%、两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN蛋白、Survivin蛋白表达在卵巢子宫内膜异位症无明显相关性(P>0.05)。正常子宫内膜组PTEN、Survivin蛋白的表达有相关性(P<0.05)。见表1。

3讨论

抑癌基因PTEN基因是1997年由Li等[1]发现并命名为PTEN，PTEN是人类肿瘤中突变率最高的基因[2]，多分布于细胞浆和细胞核内。目前认为通过局灶黏附激酶(focal adhesionkinase，FAK)途径、磷脂酞肌醇3，4，5三磷酸(phosphatidylinositol 3，4，5trisphosphate，PIP3)途径、蛋白激酶(MAPK)途径抑制细胞增长、促进细胞凋亡。本研究提示PTEN蛋白在EMs患者和正常子宫内膜的阳性表达率分别为70%和100%，明显低于正常子宫内膜，差异有统计学意义，与李淑娟等[3]的研究相同。提示PTEN在EMs中的不同程度的缺失，导致对细胞的凋亡减少，从而促使子宫内膜的发生、发展，提示PTEN表达的改变可能是EMs发生的机制之一。抗凋亡基因Survivin基因是新近发现的凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)基因家族的新成员，其表达的蛋白是目前分子量最小、抗凋亡作用最强的凋亡抑制蛋白。1997年耶鲁大学Altieri等在人类基因组文库中筛选出Survivin基因。Survivin主要在胎儿期正常组织表达，在成人正常的大肠黏膜、睾丸、甲状腺、子宫内膜和肾上腺髓质中有部分或全部低表达[4]，但在大多数肿瘤及转化细胞系中都有表达，其表达主要定位于细胞质中[5]。Survivin可抑制caspase的功能，达到抑制细胞凋亡[6]。本研究提示Survivin蛋白在EMs患者和正常子宫内膜的阳性表达率分别为75.0%和35.0%，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。与王华等[7-8]报道的结果一致。提示Survivin蛋白可能通过抑制异位内膜细胞的凋亡而使得异位内膜细胞增殖，促使子宫内膜异位症出现类似恶性肿瘤的侵袭性生长。因此，笔者认为Survivin蛋白可能对子宫内膜异位症的发生、发展起重要作用。PTEN、Survivin在EMs患者和正常子宫内膜的增生期和分泌期中表达相比差异无统计学意义，可能PTEN、Survivin与子宫内膜的周期性变化无关。而本研究提示，PTEN、Survivin在EMs表达不相关，可能两者对子宫内膜异位症的发生发展起着独立的作用，也可能与病例数较少有关，有待于进一步研究。综上所述，EMs的发生、发展是一个复杂过程，这一过程涉及多个细胞因子的作用及多个基因的激活或抑制。PTEN、Survivin与EMs发生、发展相关，两者可能相互独立。PTEN在卵巢子宫内膜异位症中低表达，而Survivin在卵巢子宫内膜异位症中有较高的表达，提示细胞凋亡异常可能是卵巢子宫内膜异位症发生的主要原因，为子宫内膜异位症的治疗提供新的途径，具有一定的临床意义。

4参考文献

[1]Ll J，Yen C，Liaw D，et al.PTEN，a putative protein tyrosinephosphatase gene mutated in human brain，breast，and prostatecancer[J].Science，1997，275(5308)：1943.

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[3]李淑娟，郭科军，花向锋，等.PTEN蛋白在卵巢子宫内膜异位症及子宫内膜样癌中的表达及其临床意义[J].中国实用妇科与产科杂志，2008，24(4)：285.

[4]Borbely AA，Murvai M，Konya J，et al.Effects of humanpapillomavirus type 16 oncoproteins on surviving gene expression[J].The Journal of General Virology，2006，87(Pt 2)：287.

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[6]Chiou SK，Jones MK，Tarnawski AS，et al.Survivin ananti-apoptosis protein：its biological roles and implications forcancer and beyond[J].Medical Science Monitor，2003，9(4)：125.

[7]王华，吴翊群，肖蔚.Survivin、ki-67在子宫内膜异位症中的表达及意义[J].中华临床医师杂志，2012，6(1)：180.

[8]Fujino K，Ueda M，Takehara M，et al.Transcriptional expression of survivin and its splice variants in endometriosis[J].Mol Hum Reprod，2006，12(6)：383.