survivin胞浆与胞核表达在原发性和转移性上皮卵巢癌中的意义

作者            作者单位

孙艳   050051 石家庄，河北医科大学第三医院

李勇   050051 石家庄，河北医科大学第三医院妇产科

范立侨 河北医科大学第四医院外三科  

王小玲 河北医科大学第四医院外三科

王玲玲 河北医科大学第四医院外三科

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取河北医科大学第三、四医院1993年9月～2003年9月手术切除且有完整临床资料的上皮性卵巢癌石蜡包埋标本47例(浆液性卵巢癌23例，粘液性卵巢癌7例，子宫内膜样卵巢癌13例，未分化癌4例)。胃源性转移性卵巢癌31例，(库肯勃氏瘤17例，低分化和未分化转移腺癌11例，中分化腺癌3例)，术前均未经过放、化疗及免疫治疗。原发卵巢癌按FIGO 2000年修订的国际妇产科联盟分期标准进行临床分期，Ⅰ、Ⅱ期26 例，Ⅲ、Ⅳ期21 例。选择同期行子宫肌瘤切除的卵巢正常组织10例，良性卵巢上皮性肿瘤20例(浆液12例，粘液8例)作为对照。

1.2 主要试剂

survivin兔抗人多克隆抗体，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。SP法试剂盒和DAB显色试剂盒均购自福建迈新技术有限公司。

1.3 免疫组化染色及结果判定

采用免疫组化SP法检测survivin胞浆和胞核的表达。结果判定： survivin阳性染色为位于细胞浆和(或)细胞核的棕黄色颗粒，随机选取5个高倍视野(×400)计数。根据阳性细胞数占百分比分成五级：0：≤5%，1：5%～24%，2：25%～49%，3：50%～75%，4：<75%，根据染色强度分为三级：1(弱阳性)，2(中等强度)，3(强阳性)，两者相加，阴性：<2分，1：≥2～3分，2：≥4～5分,3：≥6～7[1，2]。

1.4 统计学方法

应用SPSS11.5软件进行χ2检验和Spearman秩和相关分析;P<0.05为差异有统计学意义，所有检验和P值均为双侧。

2 结果

2.1 survivin在原发上皮性卵巢癌中的表达及与临床病理特征关系

47例原发上皮性卵巢癌中survivin在胞核、胞浆的阳性表达率分别为72.4%、87.2%，其中胞核阳性者胞浆均阳性，见图1。20例良性卵巢上皮性肿瘤survivin在胞核、胞浆的阳性表达率分别为55%、40%，10例正常组织均为阴性。原发上皮性卵巢癌中survivin在胞核、胞浆的阳性表达率较良性肿瘤和正常卵巢组织均显著升高(P<0.05, P<0.01)。survivin胞核阳性表达与年龄有关(P=0.013)，胞浆阳性表达与临床分期有关(P=0.013)，与病理类型、组织分化、肿瘤大小、腹水及瘤细胞均无关(P>0.05)。

2.2 survivin在转移性上皮性卵巢癌中的表达及与临床病理特征关系

31例转移性卵巢癌中survivin胞核、胞浆阳性率分别为100%、90.4%，其中胞浆阳性者胞核均阳性，见图2。20例良性卵巢上皮性肿瘤survivin胞核、胞浆阳性率分别为55%、40%，10例正常组织均为阴性。原发上皮性卵巢癌中survivin在胞核、胞浆的阳性表达率较良性肿瘤和正常卵巢组织均显著升高(P<0.01)。survivin在胞浆的阳性表达与肿瘤大小有关(P=0.019)，survivin在胞核的阳性表达与年龄等临床参数均无关(P>0.05)。

3 讨论

survivin是凋亡抑制蛋白IAP家族中最小的分子,分子量为16.5KD。与其他IAP不同，其既可以抑制细胞凋亡，又可调节细胞周期。survivin通常在成人分化成熟的组织中不表达，但在胚胎组织、癌前期病变和癌组织中普遍表达，这些均提示survivin是一种潜在肿瘤标记物。以往认为survivin是一种细胞浆蛋白，但近年来研究证实其是一种依赖移出受体在胞浆和胞核来回移动的蛋白，随着肿瘤生物学特性的不同而表达不同。研究发现，survivin细胞核阳性表达在胃癌、乳腺癌和膀胱癌是预后良好的指标[2，3]。Kleinberg等[4]和Tringler[5]等在卵巢癌survivin研究中也证实，survivin在胞浆、胞核阳性表达的意义是不同的，胞浆阳性表达增强可能参与卵巢癌的转移和渗出的形成;而在交界性肿瘤和良性肿瘤中survivin胞表达高于癌组织，且是化疗前卵巢癌病人预后良好的指标。我们的研究发现：survivin胞核和胞浆阳性表达在原发性上皮性卵巢癌阳性率分别是72.4%、87.2%，在转移性上皮性卵巢癌是100% 、90.4%，且均较良性肿瘤(55%，40%)和正常卵巢组织(阴性)中升高(P<0.05, P<0.01)，胞核阳性表达率在原发性和转移性上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P=0.002)，在原发卵巢癌中，survivin胞核和胞浆阳性表达与临床病理特征的关系不同，胞核中survivin在低年龄组(<55岁)中表达显著增强(P=0.013),胞浆survivin在晚期病人中表达显著增强(P=0.013),在转移癌且肿瘤直径≥5 cm组中,胞浆survivin表达显著增强。这些结果提示：survivin表达增强，特别是survivin胞浆表达增强，可能是卵巢癌的发生、发展和转移的一个重要因素。胞核阳性表达可能在转移性上皮性卵巢癌形成过程中起更重要作用，可作为临床鉴别两者的参考指标。

关于survivin胞浆、胞核表达和机制的研究尚不完全清楚，Rodriguez等[6]在对survivin两个剪接异构体survivinΔEx3和survivin2B分析时发现，survivinΔEx3包含一种核定位信号能使其在胞核的强表达，而survivin2B是一种主要定位于胞浆的迁移蛋白，两者不同的定位可能与survivin的胞浆、胞核不同表达有关。因此有待亚细胞水平的进一步研究，协助我们明确恶性卵巢肿瘤发生和转移过程中，survivin胞浆、胞核表达差异及其对凋亡调节的分子机制。

【参考文献】

[1] Konno R, Yamakawa H, Utsunomiya H,et al. Expression of survivin and bcl2 in the normal human endometrium[J].Molecular Human Rep,2000,6(6):529534.

[2] Vischioni B, Valk P, Span S W, et al.Nuclear localization of survivin is a positive prognostic factor for survival in advanced nonsmallcell lung cancer[J].Annals of Oncology,2004,15(11):16541660.

[3] 胡雪君,宋娜,刘云鹏,等.凋亡抑制蛋白survivin 和 bcl2在非小细胞肺癌中的表达和意义[J].中国肿瘤临床,2007，34(2)：3235.

[4] Kleinberg L, Florenes VA, Silins I, et al. Nuclear expression of survivin is associated with improved survival in metastatic ovarian carcinoma[J]. Cancer,2007,109(2):228238.

[5] Tringler B, Lehner R, Shroyer AL,et al. Immunohistochemical localization of survivin in serous tumors of the ovary[J]. Appl Immunohistochem Mol Morphol, 2004,12(1):4043.

[6] Rodriguez JA, Span SW, Ferreira CGM, et al. CRMImediated nuclear export determines the cytoplasmic localization of the antiapoptotic protein surviving[J]. Exp Cell Res,2002,275(1):4453.