冠心病患者同型半胱氨酸与白细胞介素8水平研究
发表时间：2011-03-25 浏览次数：318次
作者：孟存良 齐晓勇 谷剑 李树仁 李英肖 刘惠良 党懿 王天红 作者单位：(河北医科大学研究生院，河北 石家庄 050051)
【摘要】 目的 测定不同类型冠心病患者同型半胱氨酸(Homocysteine，HCY)以及白细胞介素8(Interleukin8,IL8)水平，探讨HCY致冠心病作用的机制。方法 冠心病患者96例(不稳定型心绞痛56例，稳定型心绞痛40例)，20例冠脉造影正常者作为对照组。根据造影结果分为单支病变组、双支病变组以及三支病变组，并根据狭窄程度计分。采用ELISA法分别测定血浆HCY、IL8水平。结果 不稳定型心绞痛组HCY、IL8水平均显著高于稳定型心绞痛组，分别为〔(20.42±5.89)μmol/L vs (14.22±4.50)μmol/L〕(P<0.01)、〔(101.93±21.23)μmol/L vs (69.91±20.15)μmol/L〕(P<0.01)，两组均明显高于对照组〔(9.98±2.95)μmol/L〕(P<0.01)、〔(43.98±15.02)μmol/L〕(P<0.01);三支病变组HCY水平为〔(21.75±6.23)μmol/L〕，高于双支病变组〔(18.24±6.17)μmol/L〕，但无显著性差异;显著高于单支病变组〔(14.82±4.01)μmol/L〕(P<0.01)，双支病变组HCY水平高于单支病变组，但无显著性差异，单支病变组、双支病变组、三支病变组均显著高于对照组。单支、双支、三支病变组IL8水平分别为〔(108.89±22.29μmol/L)〕、〔(90.59±12.59)μmol/L〕、〔(73.04±24.03)μmol/L〕均显著高于对照组(P<0.01)。Logistic分析及多元逐步回归分析发现HCY为不稳定型心绞痛和冠心病患者病变狭窄程度的独立危险因素。相关分析表明HCY与IL8呈正相关，相关系数r=0.718(P<0.01)。结论 HCY通过激发炎性反应，导致IL8水平增高，引起冠心病患者冠状动脉病变不稳定和狭窄程度加重。
【关键词】 冠心病;冠状动脉造影;同型半胱氨酸血症;白细胞介素8
Study on levels of homocysteine and interleukin8 in patients with coronary heart disease
MENG CunLiang, QI XiaoYong, GU Jian, et al.
School of Graduate, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051, Hebei, China
【Abstract】 Objective To explore the effect and its clinical significance of homocysteine (HCY) on levels of interleukin8 (IL8) in patients with coronary heart disease (CHD). Methods 96 CHD patients were selected, including 56 patients with unstable angina pectoris (UAP) and 40 patients with stable angina pectoris (SAP). 20 normal persons were selected into control group, whose coronary angiography (CAG) were normal. According to CAG results, the patients were divided into single, double, and triplevessel lesions groups, and the scores were calculated by the extent of stenosis. Levels of HCY and IL8 were measured by ELISA.Results The levels of HCY and IL8 were significantly higher in UAP groups than those in SAP group 〔(20.42±5.89) vs (14.22±4.50) μmol/L, P<0.01; (101.93±21.23) vs (69.91±20.15) μmol/L,P<0.01〕, and they were significantly higher than those in control group〔(9.98±2.95) and (43.98±15.02) μmol/L，all P<0.01〕. The level of HCY in patients with triplevessel lesions 〔(21.75±6.23) μmol/L〕 was higher than that in doublevessel lesions 〔(18.24±6.17) μmol/L〕, and there was no difference between them, but it was higher than that in singlevessel lesions group 〔(14.82±4.01) μmol/L〕, and there was obvious differenc between them. There was no differenc between double and singlevessel lesions groups, and they were all higher than that of control group. The levels of IL8 in three lesions groups were (108.89±22.29)，(90.59±12.59) and (73.04±24.03) μmol/L respectively, and there were obvious differences among them (all P<0.01). Logistic and multiple regression analysis showed that HCY was an independent risk factor UAP and CHD patients. Correlation analysis showed there weas positive relation between HCY and IL8 (r=0.718, P<0.01). Conclusions HCY increase the level of IL8 by activating inflammation response and result in the increasing of unstability of lesions and development of stenosis.
【Key words】 Coronary heart disease; Coronary angiography; Homocysteine; Interleukin8
冠心病是在多种危险因素作用下，冠状动脉粥样硬化基础上产生粥样斑块，并引起管腔狭窄甚至闭塞的病理生理过程，其中炎性反应参与冠心病的发生。高同型半胱氨酸血症(Hyperhomocysteine，HCY)是新的冠心病独立危险因素〔1〕。本研究通过测定不同类型冠心病患者HCY以及炎性因子白介素8(Interleukin8,IL8)水平，分析HCY对冠心病患者IL8水平的影响及意义，探讨HCY致冠心病的作用机制。
1 资料与方法
1.1 对象 住院并行冠状动脉造影证实的冠心病患者96例，不稳定型心绞痛组(unstable angina pectoris，UAP)患者56例，稳定型心绞痛组(stable angina pectoris，SAP)患者40例,均有典型的劳累诱发的心绞痛，休息可缓解。以上患者均由冠状动脉造影确诊。20例冠状动脉造影正常者作为对照组。根据冠状动脉造影结果分为单支病变组、双支病变组以及三支病变组，根据冠状动脉狭窄程度及部位进行记分。排除标准：急性心肌梗死，风湿性心脏瓣膜病，左室射血分数<30%，各种急性、慢性感染，严重肝、肾功能不全，恶性肿瘤，自身免疫性疾病，脑血管及外周血管疾病，服用维生素类药物，雌激素缺乏者。入选前均未服用他汀类药物。
1.2 方法 所有入选者冠状动脉造影前采外周静脉血10 ml，加入抗凝剂枸橼酸钠，30 min内2 000 r/min离心15 min，取上清液得血浆标本，编码以上血液标本并置入-80℃冰箱保存。HCY测定采用挪威Axisshield公司生产HCY定量检测试剂盒。IL8药盒为美国ADI公司生产。采用酶联免疫法，应用意大利西亚克公司生产LISER全自动酶免分析系统进行检测，实验步骤严格按照说明书操作。经股动脉采用Judkins法行冠状动脉造影。按直径法计算冠状动脉狭窄程度，冠状动脉(左前降支、左回旋支、右冠脉)中任何一支狭窄程度>50%为有意义病变。根据狭窄病变累及冠脉支数，分为单支、双支、三支病变组，对于左主干病变者，无论LAD、LCX有无病变均归为双支病变组，若同时合并右冠脉病变则归为三支病变组。冠脉狭窄记分〔2〕：(1)血管的选取：选用8支主要的血管段(左主干、前降支近段、前降支中段、第1对角支、回旋支近段、回旋支中段、右冠脉近段、右冠脉中段共8只血管段，若间隔支、第2对角支、钝缘支、前降支远段血管中有任一血管的直径超过上述8支血管中所选的任一血管，即用该支血管取代直径较小的血管)。(2)血管的评分按血管最狭窄处评分：0分：狭窄<25%;1分：狭窄25%～49%;2分：50%～74%;3分：75%～99%;4分：100%(完全闭塞);最后总分为8支血管积分的总和，若一支血管段多处狭窄，则以该段血管最狭窄处计分。
1.3 统计学处理 所有数据输入SPSS10.0统计软件包进行统计，首先进行组间均衡性检验，计量资料以x±s表示，先行方差分析，然后再作多组均数的两两比较，计数资料采用χ2检验,相关资料采用相关分析法计算相关系数，并进行多元Logistic回归分析。
2 结果
2.1 一般情况 各组患者一般均无显著性差异。见表1、表2。
2.2 各组之间各项参数的比较 UAP组HCY、IL8水平均显著高于SAP组，分别为〔(20.42±5.89)μmol/L〕 vs 〔(14.22±4.50)μmol/L〕(P<0.01)，〔(101.93±21.23)μmol/L vs (69.91±20.15)μmol/L〕(P<0.01)，且均明显高于对照组〔(9.98±2.95)μmol/L〕(P<0.01);〔(43.98±15.02)μmol/L〕(P<0.01)。三支病变组HCY水平为〔(21.75±6.23)μmol/L〕，高于双支病变组〔(18.24±6.17)μmol/L〕，但无显著性差异;显著高于单支病变组〔(14.82±4.01)μmol/L〕(P<0.01);双支病变组高于单支病变组，但无显著性差异;单支病变组、双支病变组、三支病变组均显著高于对照组〔(9.98±2.95)μmol/L〕。单支、双支、三支病变组IL8水平分别为〔(108.89±22.29)μmol/L〕，〔(90.59±12.59)μmol/L〕，〔(73.04±24.03)μmol/L〕，均有显著性差异(P<0.01)，三支病变组均显著高于对照组〔(43.98±15.02)μmol/L〕。对照组无冠脉狭窄，而三支病变组冠脉积分为〔(13.75±3.62)分〕较双支病变组〔(7.81±4.06)分〕和单支病变组〔(3.4±2.84)分〕均明显增高(均P<0.05)，且双支病变组较单支病变组也明显增高(P<0.05)。
表1 UAP、SAP、正常对照组一般情况(略)
TG：甘油三酯， TC:总胆固醇， HDL:高密度脂蛋白， LDL:低密度脂蛋白， VLDL:极低密度脂蛋白
表2 三支病变、双支病变、单支病变组以及正常对照组临床情况比较(略)
2.3 相关分析 以不稳定型心绞痛为因变量,年龄、HCY、TG、TC、HDLC、LDLC、原发性高血压、糖尿病、家族史及吸烟等均作为自变量进行多元Logistic逐步回归分析，发现最后进入模型的变量为HCY、LDLC，HCY对于不稳定型心绞痛的危险性比值(RR)为1.554(95%CI1.134～2.130，P=0.001)。表明HCY为冠心病患者病变不稳定的独立危险因素。以冠脉狭窄积分为因变量，年龄等上述因素作为自变量，进行多元逐步回归分析，发现最先进入模型的变量为HCY(偏回归系数=0.486,P=0.006)以及年龄(偏回归系数=0.142，P=0.036)。表明HCY是冠心病患者病变狭窄程度的独立危险因素。相关分析表明HCY与IL8呈正相关，相关系数r=0.718(P<0.01)。
3 讨论
本研究显示，不稳定型心绞痛组患者血浆HCY水平明显高于稳定型心绞痛组及对照组，同时不稳定型心绞痛患者的一般情况与稳定型心绞痛相比，无显著差异。多因素分析结果表明，HCY在不稳定型心绞痛发病中为独立危险因素。表明HCY水平升高可能与不稳定型心绞痛有关，这与国内外的报道相一致〔3〕。冠脉病变程度是反映冠心病病情轻重的指标之一，Verhoef等〔4〕证实冠心病患者HCY升高的水平与冠脉阻塞支数呈线形相关。本研究发现，随着冠脉病变支数的增多，血浆HCY水平增高，狭窄程度积分与HCY呈正相关。多因素逐步回归分析表明，HCY水平与冠脉狭窄积分独立相关。
HCY促进动脉粥样硬化的机制仍未完全阐明，其机制可能包括内皮功能紊乱,平滑肌细胞增殖,促进凝血的发生及脂质氧化等因素〔5〕。炎性反应在动脉粥样硬化中的作用越来越受到人们重视，动脉粥样硬化形成的炎症学说〔6〕认为，炎症是动脉粥样硬化发病的重要原因，参与动脉粥样硬化的粥样斑块的形成、破裂及血栓形成，各个阶段均出现血管损伤的炎性反应〔7〕。研究已经证明白细胞介素8等趋化因子及其特异性受体在动脉粥样硬化中起重要作用〔8〕。
最近有研究证实HCY可以促进人全血及单核细胞IL8分泌增加，HCY可能通过提高单核细胞分泌IL8而在冠心病的发病中起重要作用〔9〕。Poddar等〔10〕报道HCY通过增加人单核细胞IL8和MCP1的分泌和表达而改变内皮功能，研究发现〔11〕,临床相应水平的HCY浓度可使IL8活性增强，mRNA表达增加。在培养的人全血细胞中，高水平的HCY促进IL8、MCP1产生〔12〕。进一步的研究表明，HCY通过蛋白激酶C,钙调蛋白,活化蛋白激酶，核因子κB信号途径导致IL8、MCP1水平升高〔13〕。
本研究表明，不稳定型心绞痛组患者HCY及IL8水平分别高于稳定型心绞痛组和对照组，多支病变组HCY及IL8水平也高于单支病变组和对照组，均有显著性差异。直线相关分析表明，HCY水平与IL8呈正相关。推测在冠心病患者冠脉病变发展过程中，HCY可激活炎性细胞如单核巨噬细胞、中性粒细胞以及内皮细胞，通过蛋白激酶C、核因子κB等途径，使炎性因子IL8等释放增多，组织中高浓度的IL8可以增强中性粒细胞黏附、移行，而循环中的IL8阻止中性粒细胞的游走并黏附于内皮细胞，使粥样斑块纤维帽的胶原成分合成减少、降解增多，由此促进斑块破裂，引起血小板聚集和血栓形成，导致冠脉狭窄程度加重乃至急性闭塞。
综上，HCY通过增强炎性激活，导致IL8水平增高，既可以使冠心病患者冠状动脉内病变不稳定，又可以使病变程度不断加重，导致冠心病的发生与发展。
【参考文献】
1 Zylberstein DE，Bengtsson C，Bjorkelund C,et al.Serum homocysteine in relation to mortality and morbidity from coronary: a 24year followup of the population study of women in Gothenburg〔J〕.Circulation，2004;109(5):6016.
2 Fujiwara R,Ktsumi Y，Hayashi T,et al.Relation of angiographically defined coronary artery disease and plasma concentration of insulin，lipid，and apolipoprotein in normolipidemic subjects with varying degree of gluclose tolerance〔J〕.Am J Cardiol，1995;75:1226.
3 Wang G，Mao JM，Wang X,et al.Effect of homocysteine on plaque formation and oxidative stress in patients with acute coronary syndromes〔J〕. Chin Med J，2004;117(11):16504.
4 Verhoef P，Kok FJ，Kruyssen DA,et al.Plasma total homocysteine，B vitamins and risk of coronary atherosclerosis〔J〕.Arterosler Thromb Vasc Biol，1997;17(5):98995.
5 Herrmann W.The importance of hyperhomocysteinemia as a risk factor for disease: an overview〔J〕.Clin Chem Lab Med,2001;39(8):666.
6 Ross R.Atherosclerosisan inflammatory disease〔J〕.N Engl J Med,1999;340(2)：11526.
7 冯宗忱.动脉粥样硬化血管壁的慢性炎症〔J〕.中华心血管病杂志，2005;33(5)：3934.
8 Peters W，Charo IF.Involvement of chemokine receptor 2 and its ligand，monocyte chemoattractant protein1，in the devoplement of atherosclerosis: lessons from knochout mice〔J〕.Curr Opin Lipidol,2001;12(2):17580.
9 王 莹，王 广，张福春，等.同型半胱氨酸诱导人单核细胞分泌趋化因子的氧化应激机制的实验研究〔J〕.中华心血管病杂志，2007;35(10)：9569.
10 Podder R，Sivas ubramanian N，Di Bello PM,et al.Homocysteine induces expression and secretion of monocyte chemoattractant protein1 and interleukin8 in human aortic endothelial cells: implications for vascular disease〔J〕.Circulation，2001;103(22):271723.
11 Zeng X，Dai J,Remick DG,et al.Homocysteine mediated expression and secretion of monocyte chemoattractant protein1 and interleukin8 in human monocytes〔J〕.Circ Res,2003;93(4):2713.
12 Zeng X，Remick DG，Wang X.Homocysteine induces production of monocyte chemoattractant protein1 and interleukin8 in cultured human whole blood〔J〕.Acta Pharmacol Sin，2004;25(11)：141925.
13 Zeng XK,Guan YF,Daniel G Remick,et al.Signal pathways underlying homocysteineinduced production of MCP1 and IL8 in cultured human whole blood〔J〕.Acta Pharmacol Sin，2005;26(1)：8591.
