细胞凋亡与急性肾功能衰竭

　　作者：闫斌,张玉平,陈锦霞 作者单位：河北北方学院临床医学本科2005级4班，河北 张家口 075000

　　【关键词】 细胞凋亡,肾功能衰竭/急性,坏死

　　急性肾功能衰竭(acute renal failure，ARF)是一种常见的临床危急重症，以泌尿功能急剧障碍和继发的水、电解质平衡紊乱内环境稳态调节失衡为特征，死亡率在50%以上，甚至高达80%[1]。血管和肾小管是ARF发生的主要因素[2]，如急性肾小管上皮细胞坏死致小管液回漏可使ARF发生。但由于临床活检及实验研究表明轻度急性肾小管坏死(acute renal tubule necrosis，ATN)与临床表现的肾功能障碍程度之间不一致，因此有学者推测存在ATN以外的肾小管上皮细胞丢失途径[3]，目前研究表明细胞凋亡是肾小管上皮细胞丢失的一个主要途径[4]。

　　细胞凋亡(apoptosis)是在一定的生理或病理条件下细胞遵循其自身的程序结束其生命的过程。其特点为染色质凝聚、胞质浓缩、胞膜空化，最后形成凋亡小体[5]。研究表明[6]，细胞凋亡在ARF发病学中的两个阶段出现，第一个阶段发生在急性缺血或肾毒素引起损伤后的12～48h内，细胞可以通过死亡配体与死亡受体、凋亡相关基因、氧化应激、线粒体细胞色素C等多种途径引起肾小管上皮细胞凋亡和功能障碍，其相关基因家族有Bcl2家族、IAP(inhibitor of apoptosis)家族和caspase家族;第二个阶段发生在肾衰竭的恢复阶段，对于清除增生细胞、重建肾小管组织结构、恢复细胞功能是有利的，提示从凋亡途径来控制和改善ARF。本文综述ARF的细胞凋亡途径及其防治对策。

　　1 死亡配体和死亡受体介导的细胞凋亡

　　死亡受体和死亡配体结合是一条形成细胞凋亡的独立激活途径，以fas和fas L为例。fas和fas L结合后形成由死亡配体-死亡受体FADD胱冬酶原分子构成的凋亡小体，经由caspase8、caspase6、caspase7参与最后激活caspase3而导致细胞凋亡。研究表明，fas/fas L、TNFα/TNFR L在LPS诱导ARF的发病学中具有重要作用：在注射LPS后TUNEL法测得肾小动脉、肾小管及周围区域的细胞凋亡数目增加，凋亡小体与肾功能改变呈正相关;免疫组化结果显示fas/fas L，TNFα/TNFR L在ARF肾组织的近曲小管、远曲小管周围表达增加。结果提示细胞凋亡可能是LPS诱导ARF的发病机制之一，且凋亡的fas/fas L、TNFα/TNFR L途径参与了肾小管上皮细胞凋亡的发生。也有研究报道[7]，fas/fas L，TNFα/TNFR L介导的凋亡途径在顺铂导致的肾小管上皮细胞损伤的病因学中与损伤直接相关：顺铂可上调小鼠fas/fas L、TNFα/TNFR L离体和在体肾脏的表达;给小鼠注射顺铂可提高肾脏中TNFR1和TNFR2 mRNA的水平，TNFα缺失小鼠TNFR2增高较TNFR1迟钝，提示TNFR2的提高是配体依赖性的[8];给TNFR1缺乏小鼠和野生型TNFR2缺乏小鼠注射顺铂后，其肾功能障碍程度、细胞凋亡指数、以及白细胞浸润均较轻，表明TNFR参与了顺铂致肾损伤的病理过程。

　　2 P53 与细胞凋亡

　　野生型P53基因具有诱导细胞凋亡的功能，但该基因发生突变后，反而可以抑制细胞的的凋亡。P53导致的凋亡在P14缺乏的细胞中被顺铂激活，并且给予特异性的P53 SiRNA能够增加顺铂耐受，说明P53在P14缺乏恶性胸膜脏层间皮瘤中起作用[9]。在RNA聚合酶Ⅲ作用下，ARF可抑制tRNA合成;当P53被敲除时，tRNA转录不受抑制，提示ARF时细胞凋亡与P53有关[10]。P53也参与负反馈途径调节细胞凋亡，如E2F1P19P53途径对局部缺血性ARF的肾小管上皮细胞增殖周期的调节起负反馈作用[11]。免疫组织化学染色发现急性损伤72h的肾小管上皮细胞在外髓表达P19蛋白。

　　3 氧自由基导致细胞凋亡

　　氧自由基(oxygen free radical，OFR)损伤细胞主要机制之一就是触发细胞膜上的不饱和脂肪酸发生过氧化链式反应，使内质网、溶酶体、线粒体等生物膜结构破坏，可使DNA变性、蛋白质氧化、髓质过氧化，导致细胞的一系列功能紊乱，并可导致细胞凋亡[12]。研究表明，汞中毒所致ARF时表现的血液流变性异常[13]以及由其引起的自由基损伤[14]，是加重ARF家兔肾组织细胞损伤和凋亡的因素[15]。ARF的缺血性损伤也发生在缺血再灌注的过程中，缺血再灌注时肾组织OFR产生增加，导致细胞凋亡或损伤。OFR介导的细胞凋亡与OFR对DNA损伤导致的ADP核糖转移酶活化和caspase酶原的活化以及脂质过氧化物等与胞内钙离子水平增加有关[12]，同时，活化对其敏感的核转录因子诱导细胞凋亡。而抗氧化剂与自由基清除剂能不同程度地抑制细胞凋亡的发生，为探讨凋亡相关疾病提供了方向[16]。

　　4 抑制凋亡与ARF治疗

　　研究表明[17]，速尿阻止缺血再灌注致大鼠ARF的促凋亡基因的表达：缺血再灌注促使皮质和髓质的细胞凋亡，导致凋亡相关基因73的Akt磷酸化显著下降，而给予速尿则明显减少缺血再灌注大鼠肾组织凋亡相关基因72的表达，显著提高AKt的磷酸化。缺血再灌注后不同时间注射抗炎因子alphaMSH可使血中尿素和肌酐的含量下降，减少fas/fas L表达，中性粒细胞浸润和白细胞粘附分子1表达下降;提示alphaMSH可以减轻缺血再灌注引起的ARF[18]。Klotho基因具有抗衰老作用，缺血再灌注后，Klotho mRNA和蛋白的表达明显下降，而实验前给予adkl可以明显提高Klotho在肝细胞而非肾细胞中Klotho mRNA和蛋白的表达，但可减轻肾组织细胞凋亡[19]。在叶酸导致的ARF中，在体实验给予叶酸可以增强炎症介质TNFα的产生，降低了Bclxl蛋白表达，导致肾小管上皮细胞凋亡;而给予抗TNFα的抗体后，降低肾组织TNFα含量，恢复肾组织Bclxl蛋白的表达，抑制肾小管上皮细胞凋亡，因此，给予TNFα阻断剂是预防和治疗ARF的良好途径[20]。

　　2008年6月闫 斌等：细胞凋亡与急性肾功能衰竭第3期2008年6月河北北方学院学报(医学版)第3期总之，多种诱发细胞凋亡的刺激因素通过使肾小管上皮细胞凋亡而导致肾功能障碍，在多种病因导致ARF的发病学中有重要意义。由于坏死具有不可逆的生物学特性，针对凋亡过程的不同靶点进行干预，抑制肾小管上皮细胞凋亡，从而减轻肾功能障碍或衰竭，可能是ARF极有希望的治疗途径，也为ARF的治疗提供了新的思路。

　　【参考文献】

　　1 Schrier RW，Wang W，Poole B，et al.Acute renal failure: definitions，diagnosis，pathogenesis and therapy[J].J Clin Invest，2004，114(1): 514

　　2 Kribben A，Edelatein CL，Schrier RW.Pathophysiology of acute renal failure[J].J Nepbrol，1999，12(2): 142151

　　3 靳风烨，梁培禾，岳明.大鼠急性肾功能衰竭时肾小管上皮细胞的凋亡及其意义[J].中华创伤杂志，2000，16(9): 529532

　　4 Rana A，Sathyanarayana P，Lieberthal W.Role of apoptosis of renal tubular cells in acute renal failure: therapeatic implications[J].Apoptosis，2001，6(12): 83102

　　5 Mori N，Matsuda T，Tadano M，et al.Apoptosis induced by the histone deacetylase inhibitor FR901228 in human Tcell leukemia virus type 1infected Tcell lines and primary adult Tcell leukemia cells[J].J Virol，2004，78(9): 45824590

　　6 Lieberthal W，Koh JS，Levine JS.Necrosis and apoptosis in acute renal failure[J].Semin Nephrol，1998，18(5): 505518

　　7 Tsuruya K，Ninomiya T，Tokumoto M，et al.Direct involvement of the receptor mediated apoptotic pathways in cisplatin induced renal tubular cell death[J].Kidney Int，2003，63(1): 7282

　　8 Ramesh G，Reeves WB.TNFR2mediated apoptosis and necrosis in cisplatin induced acute renal failure[J].Am J Physiol Renal Physiol，2003，285(4):610618

　　9 HopkinsDonaldson S，Belyanskaya LL，SimoesWust AP，et al.P53induced apoptosis occurs in the absence of P14 (ARF) in malignant pleural mesothelioma[J].Neoplasia，2006，8(7):551559

　　10Morton JP，Kantidakis T，White RJ.RNA Polymerase Ⅲ transcription is repressed in response to the tumour suppressor ARF[J].Nucleic acids Res，2007，35(9):30463052

　　11Tanaka H，Terada Y，Okado T，et al.Role of the E2F1P19P53 pathway in ischemic acute renal failure[J].Nephron Physiol，2005，101(2): 2734

　　12高斌，高洪.氧自由基与细胞损伤[J].动物医学进展，2002，23(5): 3436

　　13赵自刚，牛春雨，侯亚利，等.急性肾功能衰竭家兔凝血功能及血液流变学的变化[J].微循环学杂志，2003，13(1): 2526

　　14赵自刚，牛春雨，侯亚利，等.急性肾功能衰竭家兔机体抗氧化能力的变化[J].疑难病杂志，2003，2(1): 56

　　15赵晓琴，刘唐威，邝晓聪，等.甘油致大鼠急性肾功能衰竭肾小管细胞凋亡的动态实验观察[J].中华急诊医学杂志，2003，12(3): 167169

　　16严崴，付少颖，崔浩.细胞凋亡的研究[J].黑龙江医学，2002，26(6): 418419

　　17Aravindan N，Aravindan S，Riedel BJ，et al.Furosemide prevents apoptosis and associated gene expression in rat model of surgical ischemic acute renal failure[J].Ren Fail，2007，29(4): 399407

　　18Jo SK，Yun SY，Chang KH，et al.AlphaMSH decrease apoptosis in sichaemic acute renal failure in rats: possible mechanism of this benefical effect[J].Nephrol Dial Transplant，2001，16(8):15831591

　　19Sugiura H，Yoshida T，Tsachiya K，et al.Klotho reduces apoptosis in experimental ischemic acute renal failure[J].Nephrol Dial Transplant，2005，20(12): 26362645

　　20Wan B，Hao L，Qiu Y,et al.Blocking tumor necrosis factoralpha inhibits folic acid induced acute renal failure[J].Exp Mol Pathol，2006，81(3): 211216