多肿瘤标志物蛋白芯片检测对泌尿系统肿瘤的诊断价值
发表时间：2011-07-21 浏览次数：857次
作者：郑加永,金艳慧,金青,陈瑞海,张德亭 作者单位：温州市第三人民医院检验科，浙江 温州 325000
【关键词】 肿瘤标志物,蛋白芯片,泌尿系统肿瘤
肿瘤标志物单项指标检测在临床上已应用多年，但存在组织特异性不强、敏感性低和费用高等不足〔1〕。近年来，临床上常将多项相关的肿瘤标志物组合对肿瘤进行检测。随着新技术的出现，尤其是蛋白芯片技术具有高速度、高通量、高灵敏等特点〔2〕，能同时获得12项肿瘤标志物的信息，大大提高了检测的灵敏度〔3〕。本实验采用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统，对泌尿系统肿瘤进行检测，探讨其对泌尿系统肿瘤的诊断价值。
1 对象与方法
1.1 研究对象 35例泌尿系统恶性肿瘤组为我院泌尿外科的住院患者，均经病理检查确诊，男性，年龄44～90(平均67±23)岁。其中，前列腺恶性肿瘤18例，膀胱恶性肿瘤17例;116例泌尿系统良性病变组为同期住院患者，男性，年龄40～84(平均62±22)岁。其中，膀胱良性疾病23例，前列腺增生93例;94例健康对照组为的健康体检者，男性，年龄43～79(平均61±18)岁。
1.2 检测方法
1.2.1 标本收集 空腹采集静脉血3 ml,3 000～3 500 r/min离心，分离血清置4℃冰箱保存且在4 d内检测完毕。
1.2.2 仪器与试剂 上海数康生物科技有限公司生产的HD2001A型生物芯片检测仪。配套试剂盒是由上海数康生物科技有限公司提供的多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统。
1.2.3 检测原理及步骤 基于双抗体夹心法的化学发光检测方法。多肿瘤标志物蛋白芯片在固相载体上包被了12 种肿瘤标志物的抗体，加入被检血清后，即可捕捉血清中相应的肿瘤标志物，然后结合标有示踪物的二抗，加入底物后经酶促催化化学反应产生光信号，用专门的芯片检测仪读取光信号，通过软件进行信号值和浓度值的换算，对肿瘤标志物进行定量分析。按试剂盒说明书操作。
1.2.4 结果判定 12种肿瘤标志物的临界值为CA199<35 kU/L;NSE<13 ng/ml;CEA<5 ng/ml;CA242<20 kU/L;Ferritin(男性<322 ng/ml;女性<219 ng/ml);βHCG<3 ng/ml;AFP<20 ng/ml;fPSA<1 ng/ml;PSA<5 ng/ml;CA125<35 kU/L;HGH<7.5 ng/ml;CA153<35 kU/L。达到或超过临界值计算机自动判定为阳性(Ferritin单独阳性不计入阳性数)。
1.3 统计学方法 使用SPSS11.0软件，组间比较采用χ2检验和方差分析。
2 结 果
2.1 各组阳性率比较 肿瘤组的阳性率为71.4%，其中膀胱肿瘤组阳性率41.2%，前列腺肿瘤组阳性率100%;良性疾病组的阳性率为23.3%，其中膀胱良性疾病组阳性率8.69%，前列腺增生组26.9%;健康对照组为1.06%。肿瘤组阳性率显著高于良性疾病组和健康对照组(均P<0.01);其中膀胱肿瘤组阳性率显著高于膀胱良性疾病组和健康对照组(P<0.05，P<0.01);前列腺肿瘤组阳性率显著高于前列腺增生组和健康对照组(P<0.01)。
2.2 12种肿瘤标志物在各组中的表达及阳性数 膀胱肿瘤组中CA199、CA242、PSA显著高于膀胱良性疾病组(P<0.05，P<0.01);CA199、CEA、CA242、βHCG、PSA显著高于健康对照组(P<0.01)。前列腺肿瘤组中NSE、CA242、fPSA、PSA、HGH显著高于前列腺增生组(P<0.05，P<0.01);CA199、NSE、CEA、CA242、βHCG、fPSA、PSA、CA125、HGH显著高于健康对照组(P<0.05，P<0.01)。见表1。
2.3 单项肿瘤标志物和多项联合肿瘤标志物对诊断恶性肿瘤的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值的比较 CA199、CA242、Ferritin、βHCG、fPSA、PSA等单项肿瘤标志物在诊断膀胱肿瘤时敏感性低，而同时测定以上6项肿瘤标志物可以提高敏感性，达到41.2%;对于前列腺肿瘤则不同CA242、Ferritin、βHCG、AFP等单项肿瘤标志物的敏感性低，但fPSA和PSA有较好的敏感性和特异性，若同时测定以上6项肿瘤标志物虽然可以提高敏感性，达到100%，但是会使特异性、准确性和阳性预测值下降。见表2。表1 各组12项肿瘤标志物的检测结果比较与同组织良性疾病组比较:1)P<0.01,2)P<0.05;与健康对照组比较:3)P<0.01,4)P<0.05表2 单项和多项联合肿瘤标志物检测比较
3 讨 论
40岁以上的男性，膀胱肿瘤和前列腺肿瘤的发病率居泌尿系统恶性肿瘤的第一位和第三位〔4〕。对于膀胱肿瘤提示用膀胱镜检查是早期诊断的有效手段，但缺乏有用的血清肿瘤标志物指标;对于前列腺肿瘤，临床大多测定前列腺特异性抗原(PSA)来早期诊断〔5〕。资料证实，不同的肿瘤可能有共同的肿瘤标志物，也可能有不同的肿瘤标志物。而同一种肿瘤由于组织类型不同，可有一种或几种肿瘤标志物。就某一项肿瘤标志物而言，它对不同种类、不同类型肿瘤的临床价值也各不相同。对某一个肿瘤，应选择对该肿瘤具有相对特异性的项目进行检测。多数人主张有选择和组合多个肿瘤标志物进行联合检测，从中选出对某一肿瘤适用的 “最佳肿瘤标志群”进行互补以提高诊断的准确性，减少假阳性或假阴性出现率。
12项肿瘤标志物蛋白芯片是集微电子、微机械、化学物理技术、计算机技术为一体的分析过程连续化、集成化、微型化的高新分析技术,并具有高速度、高通量、高灵敏度等特性〔6〕。本文研究结果显示，12种肿瘤标志物蛋白芯片系统能提高泌尿系统肿瘤的诊断敏感性，并有效鉴别泌尿系统恶性肿瘤与良性疾病，其中膀胱肿瘤组中CA199、CA242、PSA的测定值显著高于膀胱良性疾病组和健康对照组;前列腺肿瘤组中NSE、CA242、fPSA、PSA、HGH测定值显著高于前列腺增生组和健康对照组。并且选择了阳性率较高的6项肿瘤标志物进行联合，并与该6项单指标进行比较。对于膀胱肿瘤来说，联合指标有较好的特异性能显著提高敏感性(41.2%)，但是仍不是理想的指标，尚需依赖膀胱镜和膀胱造影进行确诊。对于前列腺肿瘤来说，联合指标比单项指标的敏感性更高。
【参考文献】
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2 Sanders G，Manz A.Chipbased microsystems for genomic and proteomic analysis〔J〕.Trends Ana Chem，2000;19(6):36478.
3 Sun ZH，Fu XL，Zhang L，et al.A Protein chip system for parallel analysis of multitumor markers and its application in cancer detection〔J〕. Anticancer Res,2004;24:115965.
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6 徐峰坡，吴翼伟，李清茹，等.多肿瘤标志物蛋白芯片检测对原发性肺癌的诊断价值〔J〕.标记免疫分析与临床，2005;12(1):13.
