病毒性心肌炎患儿细胞因子的改变及临床意义

病毒性心肌炎患儿细胞因子的改变及临床意义作者：江德勤 周素清 周宏 陶珂 朱元芳 宋自阆    作者单位：643000四川自贡市第四人民医院儿科    【摘要】  目的 探讨白细胞介素6、8（IL6、IL8）、肿瘤坏死因子（TNFα）与病毒性心肌炎（VMC）的相关性。方法 采用双抗体夹心（ELISA）法测定48例患儿及48名健康儿童外周血清IL6、IL8、TNFα水平。结果 VMC组IL6、IL8、TNFα分别为（39.73±77.4） pg/ml、（142.27±36.12） pg/ml、（23.27±14.24） pg/ml，健康组分别为（30.26±89.0） pg/ml、（42.17±20.38） pg/ml、（19.91±11.14） pg/ml，VMC组IL6、IL8、TNFα水平均显著高于健康组（P均＜0.05）。结论 IL6、IL8、TNFα参与了VMC的发病，检测VMC患儿IL6、IL8、TNFα水平有助于VMC的诊断、病情估计和预后，并为临床治疗开辟新途径。    【关键词】  心肌炎; 白细胞介素类; 肿瘤坏死因子α    因病毒性心肌炎（VMC）是一种复杂的疾病，有大量的病理机制参与此病，这些机制呈一个慢性的连锁反应，在很多情况下起重叠作用［1］。所以临床诊断、治疗、以及估计其预后都非常困难。目前临床上通常采用心肌酶谱及cTnI指标判断心肌损伤，其也是VMC的诊断、病情估计和预后判断的重要指标，但因其受影响因素较多以及持续时间较短，在临床应用上受到一定的限制，给临床诊断和治疗带来很大的困难。所以需为临床VMC的诊断、判断病情和预后提供一简单而敏感的指标，以免漏诊、误诊。既往研究认为VMC与细胞因子有密切关系，细胞因子在诱导和发生免疫病理过程中起重要作用。本研究通过检测48例VMC患儿急性期血清IL6、IL8、TNFα水平变化，以明确IL6、IL8、TNFα在VMC发病中的作用与估计VMC病情和预后的关系。1  资料和方法    1.1  一般资料    1.1.1  VMC组  均为2005年1月至2006年6月在我科确诊VMC患儿48例。男28例，女20例；年龄2～12岁；均符合2000年中华医学会儿科学分会心血管组制定的VMC诊断标准［2］。    1.1.2  健康对照组  选择本院同期无感染、腹泻史，经查体为健康儿童48名。男27名，女21名；年龄2～12岁。与VMC组比较，差异无统计学意义。清晨空腹抽取静脉血2～3 ml，自凝，3000 r/min,离心5 min后取血清，分装，置于-20 ℃冰箱保存备用。    1.2  方法    细胞因子：IL6、IL8、TNFα采用双抗体夹心（ELISA）法（试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，由美国R&D公司生产）。    1.3  统计学处理    所有数据用SPSS 11.5软件包处理，结果以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。2  结果    IL6、IL8、TNFα检测结果    见表13  讨论    IL6是具有多种生物学效应的一种细胞因子，包括刺激β细胞分化，激活胸腺细胞与刺激T细胞分化，激活巨噬细胞及NK细胞等。有报道认为IL6具有抗病毒活性，早期可以激活免疫反应和减少病毒复制。但持续和过度的IL6升高将导致心肌损害，早在2001年Tanaka等［3］在脑心肌炎病毒（MCMV）导致的心肌炎动物模型的血浆中发现IL6明显升高，认为IL6在鼠VMC可诱导心肌损害。本研究结果发现，VMC患儿急性期IL6水平显著高于健康对照组，可能是在病毒的急性期特别是病毒血症期，由于病毒成分的刺激和诱导，导致单核巨噬细胞为主的免疫活性细胞产生大量的IL6，提示IL6与VMC发病有关。IL8是一种免疫效应细胞生长刺激因子，由巨噬细胞、B细胞及其他抗原递呈细胞产生，具有多种生物学活性，Meki等［4］研究发现在蜂毒患儿的心肌损伤中其cTnI和IL8均明显升高。cTnI作为诊断蜂毒心肌损伤的特异标志物，其他的生物标志物无此特异性，在该项研究中IL8与cTnI同步升高，说明其参与了蜂毒心肌损伤的发病过程。该项研究证实了cTnI与IL8可以作为蜂毒心肌损伤的预测指标。本研究结果发现VMC患儿急性期IL8水平显著高于健康对照组，提示IL8参与了VMC的发病过程。TNFα主要由单核巨噬细胞产生，是机体炎症与免疫系统的重要调节因子，且与心肌炎及扩张性心肌病的发生有关。Lane等［5］的实验已证实TNFα与小鼠CVB3心肌炎的发生与局部TNFα的产生及分泌有关。而且进一步证实应用TNFα可使小鼠心肌炎加重。在小鼠EMCV心肌炎模型中，应用TNFα抗体可减轻心肌炎病变并提高生存率。Satoh等［6］在心肌炎患者心内膜心肌标本中，发现TNFα及TNFα转换酶的表达显著增加，说明其与心肌炎的发生机制有重要关系。而且可能进一步影响心肌炎患者的心功能。2004年Calabrese等［7］研究证实，TNFα在小鼠心肌炎的发生机制及加重心脏功能失调方面均起重要作用。然而Wada等［8］研究认为TNFα在VMC早期可抗病毒，提高存活率。但TNFα过高又可直接破坏心肌细胞参与VMC形成。所以TNFα在VMC的形成中起双重作用，其机制可能是高浓度的TNFα直接破坏心肌细胞，诱导VMC的形成；TNFα异常会导致免疫调节网络功能失常，在VMC的自身免疫形成中起作用；TNFα可显著增加白细胞、心肌细胞及血管内皮细胞膜免疫黏附分子的表达，促使大量淋巴细胞向心肌浸润。2005年Tang等［9］在MCMV导致的心肌炎动物模型中发现在心肌组织中有TNFα表达。提示TNFα在VMC的病理过程中起重要作用。本研究结果发现48例VMC患儿急性期TNFα含量显著高于正常对照组，提示TNFα与VMC发病有关。2005年Paleev等［10］报道，严重的VMC患儿血清TNFα升高明显，而在预后良好的VMC患儿血清TNFα较健康人升高，但升高程度不如严重的VMC患儿。Kanda等［11］报道，在心血管疾病中，血IL6水平与左室功能不全有密切相关性，可预测患儿的预后。    总之，VMC患儿急性期血清IL6、IL8、TNFα水平的变化，提示IL6、IL8、TNFα参与VMC的发病。在VMC患儿检测该指标具有重要意义，可协助诊断及判断病情轻重与预后。【参考文献】［1］Mason JW.Myocarditis and dilated cardiomyopathy: an inflammatory link .Cardiovasc Res, 2003，60:510.［2］中华医学会儿科学分会心血管学组,《中华儿科杂志》编辑委员会.病毒性心肌炎诊断标准（修改草案）.中华儿科杂志,2000,38：75.［3］Tanaka T，Kanda T,McManus BM,et al. Overexpression of interleukin6 aggravates viral myocarditis: impaired increase in tumor necrosis factoralpha.J Mol Cell Cardiol, 2001,33:16271635.［4］Meki AR, Mohamed ZM, Mohey Eldeen HM. Significance of assessment of serum cardiac troponin 1 and interleukin8 in scorpion envenomed children. Toxicon,2003,41:129137.［5］Lane JR, Neumann DA, LafondWalker A, et al. Interleukin 1 or tumor necrosis factor can promote Coxsackie B3induced myocarditis in resistant B10.A mice.J Exp Med,1992,175:11231129.［6］Satoh M, Nakamura M, Satoh H,et al.Expression of tumor necrosis factorαlphaconverting enzyme and tumor necrosis factoralpha in human myocarditis. J Am Coll Cardiol，2000,36:12881294.［7］Calabrese F, Carturan E, Chimenti C,et al. Overexpression of tumor necrosis factor (TNF)alpha and TNFalpha rece［8］Wada H, Saito K, Kanda T, et al. Tumor necrosis factorαlpha (TNFαlpha) plays a protective role in acute viralmyocarditis in mice: A study using mice lacking TNFalpha. Circulation,2001,103:743749.［9］Tang X, Liao Y, Chen Z，et al. Expression of IL1 beta and TNFalpha in MCMV myocarditis and its role.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2005,25:254256, 259.［10］Paleev NR, Paleev FN, Suchkov SV,et al. Cytokines as a diagnostic and therapeutic tool in patients with myocarditis. Vestn Ross Akad Med Nauk,2005，813.［11］Kanda T, Takahashi T. Interleukin6 and cardiovascular diseases. Jpn Heart J, 2004,45:183193.