内皮脂肪酶与冠心病的相关性研究

内皮脂肪酶与冠心病的相关性研究作者：成丽英，边云飞 ，杨晓静 ，赵 欣，肖传实    作者单位：山西医科大学第二临床医学院，太原 030001    【摘要】  目的 检测冠心病患者血浆内皮脂肪酶（EL）水平，探讨EL与冠心病的相关性。 方法 选取81例冠心病患者，并根据临床表现分为稳定性心绞痛（SAP）（n=18）、不稳定性心绞痛（UAP）（n=23）、急性心肌梗死（AMI）（n=21）及对照组(n=19)。所有患者分别进行病史采集，并检测空腹血糖（FBG）、血脂、高敏C反应蛋白（hsCRP）、EL水平，分析EL与年龄、性别、吸烟比例、HDLC、LDLC、FBG、hsCRP及冠状动脉病变程度的相关性。 结果 对照组血浆EL水平为（346.4±54.3）μg/L，而SAP组、UAP组、AMI组分别为：（693.2±89.7）μg/L、（780.3±99.2）μg/L、（962.5±123.3）μg/L，各组间EL水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)；EL与HDLC、LDLC、FBG及hsCRP明显相关（P＜0.05)；Gensini评分SAP组分别与UAP组、AMI组比较，差异有统计学意义（P＜0.01)，冠心病组EL平均水平与冠状动脉狭窄程度Gensini平均评分呈正相关（r=0.483，P＜0.01)。 结论 冠心病患者体内EL表达明显增高，EL在冠心病的发生中可能起一定的作用。    【关键词】  内皮脂肪酶； 冠心病    Correlation study of endothelial lipase to coronary heart disease   CHENG Liying1, BIAN Yunfei2,YANG Xiaojing2, ZHAO Xin1, XIAO Chuanshi2. 1.Second Clinical Medical College of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001; 2. Second Affiliated Hospital of Shan Xi Medical University, Taiyuan 030001, China    Abstract：Objective  To investigate the correlation between plasma endothelial lipase (EL) level and coronary heart disease (CHD).    Methods  A total of 81 patients were enrolled and divided into four groups: stable angina pectoris group (SAP, n=18), unstable angina pectoris group (UAP, n=23), acute myocardial infarction group (AMI, n=21) and control group (n=19). Clinical history was collected and fasting blood glucose（FBG）, highdensity lipoproteincholesterol(HDLC), lowdensity lipoproteincholesterol(LDLC), high sensitiveC reactive protein(hsCRP) levels were determined. Relevance of EL to age, sex, smoking proportion, HDLC, LDLC, FBG, hsCRP levels and coronary lesion was analyzed.   Results  Plasma EL level was (346.4±54.3) μg/L in the control group, (693.2±89.7) μg/L in SAP group, (780.3±99.2) μg/L in UAP group and (962.5±123.3) μg/L in AMI group. The differences among the four groups were statistically significant (P＜0.05). Significant correlation between EL level and HDLC, LDLC, FBG and hsCRP levels were found (all P＜0.05). Gensini scoring of SAP group was significantly different from the other three groups (all P＜0.05). There was positive correlation between EL level and coronary lesion (r=0.483 P＜0.01).   Conclusions  EL expression is increased in CHD patients. EL might play an important role in the genesis of CHD.    Key words：  Endothelial lipase；  Coronary heart disease    在冠心病患者尸体解剖中，发现内皮脂肪酶（endothelial lipase，EL）在冠状动脉粥样硬化斑块的内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞中均存在表达[1]，但是冠心病患者体内EL的表达水平及EL水平与冠心病病变程度的研究，目前国内外报道甚少。本研究对冠心病患者的血浆EL水平进行了检测，并与冠心病的危险因素及冠状动脉病变程度相关性进行了分析，报道如下。1  对象和方法    1.1  研究对象    选取2006年9月至2007年9月山西医科大学第二医院心内科冠状动脉造影确诊的冠心病患者，分别进行病史采集，检测空腹血糖、血脂、血清高敏C反应蛋白（hsCRP）及进行心电图检查。排除(1)急慢性感染、创伤或手术2周以内；(2)合并脑血管意外或外周血管疾病、肝肾功能不全、恶性肿瘤、慢性结缔组织疾病或免疫性疾病。    1.1.1  诊断标准  冠心病确诊条件为：(1)根据典型的临床症状、心电图改变以及心肌酶谱变化而确诊的AMI或OMI。(2)经心电图证实有明确心肌缺血的典型心绞痛发作史。(3)冠状动脉造影证实存在冠状动脉狭窄≥50％病变并有心肌缺血心电图改变或典型心绞痛发作史。    1.1.2  分组  根据冠心病患者临床表现、生化检查、心电图和冠状动脉造影结果将入选的81例患者分为：稳定性心绞痛组(SAP组，n=18)、不稳定性心绞痛组(UAP组，n=23)、急性心肌梗死组(AMI组，n=21)及对照组19例，对照组临床表现或心电图变化怀疑冠心病，经选择性冠状动脉造影术证实无冠状动脉狭窄。    1.1.3  CAG结果评估  CAG采用Judkin法,每支血管选择最佳多体位投照,以国际通用的直径法和血管积分法,由2名有经验的医师对造影结果进行评估:(1)冠状动脉病变支数:造影示管腔狭窄≥50%者认定该支血管为病变血管,左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)或右冠状动脉(RCA)中有1支狭窄者均归为单支病变组;2支有病变者归为双支病变组;3支均有病变者归为3支病变组。对于左主干(LM)病变者,无论LAD或LCX有无病变,均归为双支病变组;若同时合并RCA病变则归为3支病变组。(2)冠状动脉狭窄程度(Jenkins)评分:按血管最狭窄处评分，若1支血管段多处狭窄,即以该段血管最狭窄处评分,管状狭窄也以最狭窄处评分，0分:狭窄＜25%;1分:狭窄25%～;2分:狭窄50%～;3分:狭窄75%～;4分:狭窄100%(完全闭塞)。最后总分为评分的总和,即各狭窄冠状动脉的累加评分。    1.2  方法    1.2.1  血标本采集  受试对象均于入院后次日清晨6∶00从肘静脉取血3 ml，置于EDTA抗凝管中，1500 r/min离心10 min，收集血浆分装入2 ml的EP管，置于－70 ℃保存待测。    1.2.2  生化指标检测  高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、空腹血糖(FBG)应用Backman LX20全自动生化检测仪进行测定；hsCRP采用免疫速率散射比浊法测定。    1.2.3  EL检测  用酶联免疫吸附法(enzyme linked immnunosorbent assay，ELIA)检测血浆EL水平(试剂盒购自武汉中美试剂公司)，严格按照试剂盒说明书操作，在96孔板中依次加入待测样品及标准品、抗人EL抗体、HRP标记的亲和素、底物TMB最后加入终止液，于波长450 nm处读取数据。    1.3  统计学处理     采用SPSS11.0统计软件分析数据，计量资料以均数±标准差（±s）表示。实验组与对照组之间的值进行方差齐性检验，各组值之间的比较采用多个样本均数比较的方差分析，血浆EL与年龄、性别、吸烟比例、血脂、血糖、hsCRP的相关性采用Pearson相关分析，且P＜0.05认为差异有统计学意义。2  结果    2.1  各组基线资料比较    见表1，各组间年龄、性别、吸烟比例差异均无统计学意义（P＞0.05），LDLC水平均在正常范围内，但对照组hsCRP水平较其他组低(P＜0.01)，而HDLC及FBG水平则较其他组高(P＜0.01)。    2.2  各组血浆EL的水平比较    对照组血浆EL水平为(346.4±54.3)μg/L，而SAP、UAP、AMI分别为：(693.2±89.7)μg/L、(780.3±99.2)μg/L、(962.5±123.3)μg/L，较对照组表达均增加，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；AMI组患者EL水平较SAP组和UAP组明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05），表1  各组一般情况及有关指标比注：与对照组比较, aP＜0．05，与SAP组比较， bP＜0．05，与UAP组比较，cP＜0．05SAP组EL水平较UAP也明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。    2.3  EL与年龄、性别、吸烟比例、HDLC、LDLC、FBG、hsCRP相关性分析    血浆EL与hsCRP、LDLC、FBG呈正相关（P＜0.01），而与HDLC呈负相关（P＜0.01），与年龄、性别、吸烟比例无显著相关性（P＞0.05），详见表2。表2  EL与各个指标的相关分析    2.4  SAP组、UAP组和AMI组患者冠状动脉Gensini评分的比较及与EL的相关性分析    SAP组冠状动脉积分（17.89±2.40）分别与UAP组（37.87±4.65）和AMI组（39.10±4.37）比较，差异有统计学意义（P＜0.01）；UAP组与AMI组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；冠心病组EL平均水平与冠状动脉狭窄程度Gnesini平均评分有明显相关性（r=0.483,P＜0.01）。    2.5  冠状动脉病变不同支数组之间EL水平比较    单支病变、双支病变、三支病变组血浆EL水平分别：(686.5±84.4) μg/L、(817.4±62.3)μg/L、(989.5±115.7)μg/L。冠状动脉病变(单支、双支、三支)组血浆EL水平均显著高于对照组(P＜0.05)，三支病变组EL水平明显高于单支病变组(P＜0.05)。3  讨论    动脉粥样硬化性心脑血管疾病是我国人群的主要死亡原因，近年研究认为炎症在动脉粥样硬化的发生、发展中起着极为重要的作用。冠心病是一多危险因素疾病，流行病学研究已证实冠心病的危险因素有年龄、性别、血脂异常、高血压、吸烟和糖尿病等，各种心血管危险因素均可促进动脉粥样硬化的形成及发展。    EL是惟一由内皮细胞合成的甘油三酯脂酶基因家族新成员，1999年Jaye[2]和Hirata等[3]两个小组分别独立克隆出了EL基因(endothelial lipase gene，LIPG)。EL与脂蛋白脂酶(1ipoprotein lipase，LPL)和肝脂酶(hepatic lipase，HL)分别具有44％和41％ 的同源性[4]。EL主要有磷脂酶的活性，可以降低血浆高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDLC)水平。实验显示高表达EL的小鼠HDLC水平下降，而EL基因敲除小鼠HDLC水平显著提高[5]。近年在冠心病患者尸体解剖中，发现在冠状动脉粥样硬化斑块中有EL的表达。血管内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞受病变等病理因素刺激后可合成EL并分泌EL于局部发挥作用[4,6,7]。EL除了主要降低HDLC等脂蛋白水平，降低高密度脂蛋白受体介导的胆固醇逆向转运外，在血管壁局部还可促进含载脂蛋白B的脂蛋白的沉积以及循环血中白细胞的黏附、迁移。    方玉强等[8]在研究循环内皮细胞(CEC)中EL的表达与冠心病患者临床表现的关系时发现冠心病患者循环内皮细胞中存在EL表达，EL＋/CECs随着临床病情的加重而显著升高。在我们的研究中也发现血浆EL表达水平在SAP、UAP、AMI患者体内表达均明显增高，提示血浆EL水平可作为冠心病患者临床病情的预测指标。    Badellino等[9]研究证实EL与高血压、脂质代谢异常、肥胖及胰岛素抵抗等相关。McCoy及Ishida等发现EL与HDLC呈负相关。Paradis[10]发现EL与hsCRP及其他炎症因子呈正相关。在我们的研究中也发现hsCRP、LDLC、FBG与血浆EL水平呈明显正相关，而HDLC与EL水平呈明显负相关，这与Badellino等[9]的研究结果一致。hsCRP、HDLC、LDLC、FBG等与冠心病的发生发展密切相关，提示EL与上述危险因素协同促进动脉粥样硬化的发生及发展。    此外，在我们的研究中还发现3组冠心病患者冠状动脉评分Gnesini与EL水平有明显相关性，且随着冠状动脉病变程度的加重，血浆EL水平逐渐增加。提示冠心病患者的血浆EL水平与冠状动脉病变的严重程度相关，可以作为评价冠心病患者冠状动脉病变程度的指标。    综上所述，CHD患者的血浆EL水平与冠心病（上接第16页）的发生及冠状动脉病变程度有密切关系，血浆EL水平有可能作为冠心病病变程度的预测指标。【参考文献】［1］AzumiH, Hiram K, Ishida T, et a1.Immunohistochemical localization of endothelial cellderived lipase in atherosclerotic human coronary, arteries［J］.Cardiovascular Res,2003,58:647654.［2］Jaye M, Lynch KJ, Krawiec J, et a1.A novel endothelialderived lipase that modulates HDLC metabolism［J］.Nat Genet,1999,21:424428.［3］Hirata K, Dichek HI, Cioffi JA, et a1.Cloning of a unique lipase from endothelial cells extends the lipase gene family［J］.J Biol Chem,1999,274:14170l4l75.［4］JIN Weijun，SUN GS，Marchadier D，et al. 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