吸烟对硝酸甘油作用的影响

作者:刘善庭,王立赞,林丽文

作者单位：山东省济宁医学院，山东，济宁 272013         【摘要】  　　目的：探讨吸烟对礼顿（glonoin，硝酸甘油）作用的影响。方法：将60只纯种新西兰兔随机分为生理盐水组（NS组）、动脉硬化组（AS组）、动脉硬化礼顿组（ASG组）、动脉硬化吸烟组（ASS组）和动脉硬化吸烟礼顿组（ASSG组）。23周后取血，检测血中超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、前列腺素（6-Kato-PGF1α）和内皮素（ET）的含量或活性，并作比较。结果：生理盐水组与其他组血SOD、NO、NOS、6-KetO-PGF1α和ET的含量或活性比较，有非常显著性差异（P<0.01）；而SOD和NOS在NS组与ASG组之间无显著性差异（P＞0.05）。与ASG组比较，ASSG组血SOD、NO、NOS、6-Keto-PGF1α的含量或活性均显著降低，EI含量显著增加，P均<0.05。结论：长时间吸烟对硝酸甘油的作用有不良影响。

   【关键词】  硝酸甘油　吸烟　动脉粥样硬化

　　Effects of smoking on nitroglycerin/LIU Shan|ting, WANG Li|zan,LIN Li|wen，WANG Qing,LI Jun,QI Ru|xia,LIANG Yu|ji,GE Shun,YU Jiang,LI Jian|mei//

　　Abstract：Objective:To study the effects of smoking on glonoine(nitroglycerin).Methods:A total 60 New Zealand rabbits were divided into five groups with twelve rabbits in each group:nomal saline control group(NS group),atherosclerosis group( AS group),atherosclerosis and smoking group(ASS group),atherosclerosis and give glonoine group(ASG group) and atherosclerosis followed  smoking and glonoine group(ASSG group).After 23 weeks,serum levels or activates of SOD,NO,NO synthase,6-keto-PGF1α and ET in each group were determined.Results:Compared with NS group,there were  very significant difference in levels or activities of SOD,NO,NO synthase,6-keto- PGF1α and ET( P<0.01) in each groups.Compared with ASG group,the levels of SOD,NO,NOS and 6-keto- PGF1α  decreased (P<0.05 all),but ET level increased ( P<0.05) in ASSG group.Conclusion:Long|time smoking has harmful effects on nitroglycerin action.

　　Author′s　address：Jining Medical College,Jining,Shandong,272013,China

　　Key words：Nitroglycerin;Smoking;Arteriosclerosis  

　　动脉粥样硬化是诱发缺血性疾病的共同病理基础。吸烟可加重机体组织缺血、缺氧病理改变，并可能影响扩血管药物药理作用的发挥。本研究旨在探讨吸烟对硝酸甘油作用的影响。

　　1  资料与方法 　　1.1  一般资料（1）动物：纯种新西兰兔，体重（1.5±0.3）kg，由鲁抗医药集团动物饲养中心供给；（2）药品：礼顿（硝酸甘油）：西安康复制药厂生产；生理盐水（NS）：山东华鲁制药有限公司生产；胆固醇：上海精析化工科技有限公司供给；超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）试剂盒：购于南京建成生物工程研究所；前列腺素（6-Kato-PGFI1α）和内皮素（ET）试剂盒购于北京解放军总医院科技开发中心放免所；蛋黄粉、猪板油本研究组自备；（3）仪器：分光光度计；低温冷冻离心机（美国科峻仪器公司，型号为RC-50C）；离心机（北京医用离心机厂出品，型号为LD25-2）；吸烟箱，空间为180 cm×120 cm×60 cm，自制；（4）其他：红塔山香烟，由红塔集团生产（购于济宁市烟草专卖部门）；饲料：由鲁抗药业集团动物饲养中心加工。

　　1.2  方法

　　1.2.1  60只健康新西兰，雌雄各半，被随机分为NS组、动脉硬化（AS）组、动脉硬化礼顿（ASG）组、动脉硬化吸烟（ASS）组和动脉硬化吸烟礼顿（ASSG）组。

　　1.2.2  试验方法：NS组兔食用标准草粉饲料，每天2次NS口腔滴入，0.2 ml/次。其余4组均予加入1.5%高胆固醇、4%蛋黄粉，4%猪板油和0.2%甲基硫氧嘧啶的标准草粉饲料（特殊饲料）。AS组兔每天食用特殊饲料；ASG组间断（每用药12 d，停药7 d)接受0.015 mg/kg·次礼顿口腔滴入，2次/d；ASS组每天8点和15点分别进入烟箱吸烟30 min（先在箱内点燃6支红塔山香烟，15 min后再点燃6支）；ASSG组兔，既接受口腔滴入礼顿还要吸烟，其量、方法同上。

　　1.2.3  采血：兔禁食12 h后，上午8时在严格消毒的条件下取血（第16周取血5 ml，供检测甘油三酯和胆固醇用；第23周取血12 ml，供检测各生化指标用）分别放于抗凝和不抗凝的试管中，备用。各指标检测方法均按试剂说明操作。

　　1.3  统计方法采用SPSS 10.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，应用t值检验法，P<0.05为差异有显著性。

　　2  结果

　　2.1  饲养16周两组兔血甘油三酯、胆固醇的含量见表1。

　　表1  两组兔血甘油三酯和胆固醇含量比较（略）

　　注：与NS组比较△P<0.05，△△P<0.01。

　　2.2  饲养23周兔各组几项参数检测结果比较饲养23周兔各组血中SOD、NO、NOS、ET、6-keto-PGF1α含量的检测结果见表2。

　　表2  饲养23周兔血各项指标含量的比较（略）

　　注：NS组：生理盐水组；AS组：动脉硬化组；ASG组：动脉硬化礼顿（硝酸甘油）组；ASS组：动脉硬化吸烟组；与NS组比较△P<0.05；与AS组比较#P<0.05；与ASG组比较▲P<0.05，▲▲P<0.01。

　　3  讨论

　　香烟中的尼古丁等化合物及烟雾中的一氧化碳（CO）等通过激活肺组织内的中性粒细胞和巨噬细胞，大量释出自由基，后者使细胞膜上的不饱和脂肪酸、过氧化物形成自由基链反应而产生醛式产物，损伤血管内皮细胞［1］。有资料证明，吸烟能促进和加重动脉粥样硬化的形成，而导致组织器官缺血缺氧，造成血管平滑肌细胞内Ca2+超负荷，直接影响线粒体的生成及损伤，出现能量供应障碍，以此形成了恶性循环[2～4]。SOD具有清除自由基等多种生理、生化功能，其活性的降低，可导致自由基大量积聚，加重血管内皮细胞的损伤，进而引起血管内皮细胞合成 NO和 NOS活性低下，而ET含量相应增加。NO为内皮源性血管舒张因子，由内皮细胞释放后激活鸟苷酸环化酶（GC）产生cAMP，使血管扩张。NOS为依赖性还原型辅酶Ⅱ的黄递酶（ND），能促进 NO合成及释放。NOS活性降低，则使NO的合成减少[4-7]，ET是一种内源性缩血管因子，具有强大的收缩血管和促进血管平滑肌细胞增殖作用。ET增加可能由多因素促成，除与NO含量减少有关外，机体组织缺血、缺氧、血小板聚集和腺苷二磷酸（ADP）释放、转化生长因子（TGF）-β等均有诱发或促进其合成、分泌、释放作用。由于ET含量的增加，提高了与其受体的结合率，经G-蛋白耦联的磷脂酶C（PLC）生成二酰基甘油（DG）、三磷酸肌醇（IP3），最终生成四磷酸肌醇（IP4）；IP3促进细胞内Ca2+释放，IP4诱发细胞外Ca2+内流，二者均使细胞内Ca2+浓度升高，并与钙调素结合使血管收缩。另外 ET还有使血管内皮细胞和成纤维细胞增加的作用。DG有激活蛋白激酶C（PKC）和磷酯酶A（PLA）致ATP敏感性钾（KATP）通道关闭等作用，参与血管收缩。正常情况下，机体内 NO和 ET之间及前列环素（PGI2）和血栓素A2（TXA2）之间的平衡，维护了血管调节功能[6～8]。硝酸甘油作为NO供体在血管平滑肌细胞内经谷胱甘肽转移酶的催化而释放出NO，使血管扩张发挥其临床治疗作用。本研究结果发现AS组和ASS组兔血中SOD、NO、NOS、6-keto-PGF1α的含量或活性降低，而ET的含量增加，尤以后者更甚。提示吸烟可加重血管内皮损伤。尽管予以硝酸甘油处理后，可减少自由基的形成及促进血管保护因子NO的释放，但这种有益作用可能由于吸烟而削弱。结果证明硝酸甘油有促进NO、前列腺素分泌，抑制ET分泌作用，而吸烟可抑制硝酸甘油的这种作用。因此，为预防、改善动脉硬化病变，减轻病情，在临床上应力促戒烟。

【参考文献】  　[1]焦云根，刘乃丰.吸烟与血管内皮功能不全[J].心血管康复医学杂志，2004，13(2)：190-193.

　　[2]Liu CY,Sturek M.Attennuation of endothelin-1-induced calcium response by tyrosine kinase inhibitors in vascular smooth muscle cell [J].Am J Physiol,1996，270:1825-1833.

　　[3]Kyniakides ZS,Kremastirnos DT.Bofilis E,et al.Endogenous endothelin maintains coronary artery tone by endothelin type a receptor stimulation in patients undergoing coronary arteriography［J］.Heart，2000，84:176-182.

　　[4]Danthuluri NR,Brown K, Brock TA.Inositol triphosphate/diacylglycerol second meseanger generation in endothelin|stimulated A-1 vascular smooth muscle cells[J].FASEB J,1989，3:719.

　　[5]Spieker LE,Noll G,Ruschitzka FT,et al.Endothelin receptor antagonists in congestive herat failure:a new therapeutic principle for the future[J].JAM Coll Cardiol,2001，37(6):1493-1505.

　　[6]Takase H,Moreau P,Luscher TF.Endothelin receptor subtypes in small arteries:studies with FR139317 and Bosentan［J］.Hypertension,1995，25(2):739-743.

　　[7]Marsden PA,Danthuluri NR,Brenner BN,et al.Endothelin action on vascular smooth muscle invlves inositol triphosphate and calcium mobilization[J].Biochem Biophys Res Commun，1989，158:86-93.

　　[8]Xiao J,Pang PKT.Does a general alteration in nitric oxide synthesis occur in spontaneously hypertensive rate [J] .Am J Physiol,1994，266.