急性冠脉综合征氧化应激损伤及与低密度脂蛋白的相关性

作者:冯毅,王积慧,沈成兴,马根

作者单位：东南大学附属中大医院心内科，江苏 南京市 210009          【摘要】  　　目的：通过检测急性冠脉综合征（ACS）患者体内晚期蛋白氧化产物（AOPP）、低密度脂蛋白（LDL）、丙二醛（MDA）的水平来探讨氧化应激损伤与急性冠脉综合症发生发展的关系。方法：入选73例急性心肌梗塞（AMI）（含46例择期PCl和27例急诊PCI）、49例不稳定性心绞痛（UAP）及21例非冠心病患者，均经造影证实。于入院即刻、24 h和48 h采集外周静脉血标本。紫外荧光光度法测定AOPP浓度；硫代巴比妥酸（TBA法）光度法测定MDA浓度等，进行Pearson相关分析。结果：AOPP浓度在AMI组（AMI择期组较急诊PCI组更高），UAP组明显升高（P<0.05）；UAP组入院48 h与入院即刻比较AOPP浓度明显下降（P<0.05）；AMI择期PCI组AOPP浓度与LDL|C呈正相关，r=0.370（入院即刻）、r＝0.422（入院24 h）、r＝0.559（入院48 h）。MDA浓度：与非冠心病组对应各时间点比较，AMI择期PCI组、AMI急诊PCI组的均升高（P<0.05～<0.01），而UAP组无显著改变（P>0.05）。结论：ACS患者血浆中AOPP、MDA浓度显著升高；AMI患者中AOPP水平与LDL呈止相关。氧化应激可能是AS发生发展过程中的重要环节，并与脂代谢失调有一定的相关性。

   【关键词】  冠状动脉疾病　氧化性应激　晚期蛋白氧化产物

　　Oxidation stress and its relationship with low density lipoprotein in acute coronary syndrome/FENG Yi, WANG Ji|hui, SHEN Cheng|xing, MA Gen|shan//

　　Abstract：Objective:To examine the advanced oxidation Protein products (AOPP), malondialdehyde (MDA) and low density lipoprotein (LDL) in patients with acute coronary syndrome (ACS) and discuss the relationship between oxidative stress and the development of ACS. Methods:Plasma collected in 73 acute myocardial infarction(AMI) patients (inlude 46 patients underwent selective PCl & 27 patients underwent emergency PCl)、 49 unstable angina pectoris (UAP） patients and 21 non|coronary artery disease (non|CAD) patients. All cases were underwent coronary angiography (CAG).Plasma collected immediately,post 24 h and  48 h after patients were recruited. AOPP were determined by measurements of optical densifty (OD) via spectrophotometry and MDA measured with TBA methods. Results:Compared with normal group (without CAD), significantly higher plasma AOPP were detected in AMl (selective PCl and emergency PCI) & UAP patients (P<0.05). Significant difference also exists between selective PCl group and  emergency PCI group in AMl patients (P<0.01). AOPP level of UAP patients  decreased significantly after 48 h(P<0.05); Pearson correlation analysis showed that AOPP was positively correlated to LDL|C in selected AMI patient. Compared with normaI group (without CAD), significantly higher plasma MDA were seen in all AMl patients (P<0.05～<0.01), but the MDA no significant change in  UAP patients (P>0.05). Conclusion:Oxidative stress may be an important step in development of ACS and may be relationship with abnormal lipid metabolism.

　　Author′s　address：Department of Cardiology, Zhongda Hospital, Southeast University,Nanjing,Jiangsu,210009,China　　　　Key words：Coronary artery disease;Oxidation stress;Advanced oxidation protein products  

　　斑块破裂和血栓形成是急性冠脉综合征（ACS），即不稳定心绞痛（UAP）和心肌梗塞的主要病理生理基础[1,2]。其中氧化应激损伤、炎症反应在这过程中可能起着非常重要的作用[3～6]。本研究测定ACS病人血浆氧化产物含量，以探讨其在ACS中的意义。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料2004年6月至2005年10月共收集本院143例疑似ACS入院病人，男97例，女37例，年龄（67±12）岁。其中122例符合2001年AHA/ACC诊断ACS标准［含73例急性心肌梗塞（AMI），46例择期 PCI和27例急诊PCI］，49例为UAP[7]。另21例作为非冠心病对照组。所有病例均常规进行冠脉造影，以明确冠脉有无动脉粥样病变及病变性质。

　　1.2  方法所有入选病人在入院即刻、24 h和 48 h共三个时间点采集外周静脉血，采血后分离血浆，-70℃冰箱保存。以备检测。（1）血脂、总胆固醇及心肌酶测定：采用酶法，脂蛋白采用匀相法，载脂蛋白采用免疫比浊法，肌钙蛋白采用免疫渗滤法进行检测；（2）晚期蛋白氧化产物（AOPP）的测定[5，8]：采用分光光度法测定AOPP，先用氯胺T制作标准曲线。取 0.3 ml血浆标本在紫外分光光度计340 nm下测出OD值。在标准曲线中以相应氯胺T浓度（μmol／L）来测定血浆AOPP浓度；（3）丙二醛（MDA）的测定[9]：采用硫代巴比妥分光光度法测定MDA，以四乙氧基丙烷作为标准品，制作标准曲线，在分光光度计532 um处测得OD值，求得MDA浓度。

　　1.3  统计学处理计量数据用均数±标准差(±s)表示。采用SPSS 12.0软件分析系统。组间比较使用方差分析，组内配对资料用配对t检验；使用Pearson相关分析，P<0.05表示差异有显著性。

　　2  结果

　　2.1  入选病人一般情况入选各组病人一般情况见表1。AMI组血常规检查的中性粒细胞数较UAP组及非冠心病组显著升高（P<0.001）；AMI组、UAP组高密度脂蛋白-胆固醇（HDL|C）较非冠心病组低（P<0.01）， 而低密度脂蛋白-胆固醇（LDL|C）在本研究中差异无统计学意义。余各指标无统计学差异。

　　表1  各组病人一般情况表（略）

　　注：P值分别为急性心肌梗塞组，不稳定型心绞痛组与非冠心病组比较结果。

　　2.2  AOPP在各组检测结果在AMI择期PCI组，AMI急诊PCI组，UAP组和非冠心病对照组四组中各时间点分别测得的AOPP含量见表2。用氯胺T制作的标准曲线方程为y=0.0018x-0.0149  R2=0.9996。依据标准方程分别计算各标本AOPP浓度。2.3  AOPP与LDL|C相关性AOPP在AMI择期PCI组中各时间点与LDL|C呈正相关。入院即刻点相关系数r为0.370，入院24 h r为0.422，入院48 h r为0.559。在其他各组中相关性较差。AOPP与LDL行Pearson相关分析亦提示AMI择期PCI组在各时间点上两者均有较好相关性。在UA组中在入院即刻时间点上有相关性。见表3。

　　2.4  MDA结果及分析在AMI择期PCI组，AMI急诊PCI组，UA组及非冠心病组中，各时间点测得的MDA值见表4。

　　表2  各组晚期氧化蛋白产物（AOPP）（μmol/L)浓度（略）

　　注：PCI：经皮冠状动脉介入术。与非冠心病组比较△P<0.05，△△P<0.01。与AMI择期组比较# P<0.05。UAP组与入院即刻比较*P<0.05。

　　表3  AOPP与低密度脂蛋白（LDL）Pearson相关分析（略）

　　注： AOPP1，2，3： 分别为入院即刻、24 h，48 h的AOPP水平。 *P<0.05，**P<0.01。表示此参数r有意义的P值。

　　表4  各组丙二醛（MDA）（nmol／ml）浓度（略）

　　注：与非冠心病组比较△P<0.05，△△P<0.01。非冠心病组与UAP组比较无统计学差异。

　　3  讨论

　　在冠状动脉粥样硬化发生发展中氧化应激学说有重要地位。AOPP是由吞噬细胞生成的次氯酸引起血浆白蛋白氧化的产物，可作为蛋白氧化损伤的标志物，反映体内的氧化应激水平[10，11]。有研究显示冠心病组患者AOPP浓度显著高于非冠心病组患者[12]；稳定性心绞痛患者与健康对照组患者 AOPP浓度无显著差异，ACS患者 AOPP浓度显著升高[8]。本研究观察到，ACS（包括AMI与UAP）患者血浆中AOPP浓度比非冠心病患者显著升高。AMI择期PCI组较急诊PCI组升高，可能是由于该组病人从发病时间到就诊已超过12 h，心肌细胞缺血、缺氧持续时间长，濒死心肌进展为不可逆的坏死心肌，大量释放氧自由基，促进产生氧化应激损伤，产生大量 AOPP[8,12]。本研究显示AMI组与UAP组AOPP均有升高，说明可能二者体内的氧化应激、血管内皮损伤过程类似；治疗后UAP组即入院48 h AOPP的下降幅度明显，表明二者损伤程度上又有所差异，UAP患者病理改变经积极的干预后可逆转，而AMI患者损伤程度重，恢复较慢。LDL|C升高是冠状动脉粥样硬化发生的独立危险因素[13]。本研究观察到AMI组AOPP与LDL－C的正相关提示LDL可能也是ACS发生发展过程中重要的危险因子。有研究显示AOPP可诱导内皮细胞产生活性氧，还可通过激活单核细胞还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶，释放细胞内活性氧，因此推测LDL被氧化为氧化型（Ox）LDL的过程可能有AOPP的参与[14，15]。机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用，形成脂质过氧化物，如丙二醛（MDA）。测定MDA的量可反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞损伤的程度。本研究观察到，与非冠心病组对应各时间点比较，AMI组血浆MDA含量升高（P<0.05），而UAP组的无明显改变。说明心肌梗塞时组织损伤及坏死较不稳定心绞痛严重，与相关报道相似[8]。

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