慢性乙型肝炎合并子宫内膜异位症患者Th1/Th2细胞应答

　　近年来发现Thl,Th2细胞对病毒的清除过程有着重要的调节作用，平衡失调是导致乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性化的重要因索l土3l。子宫内膜异位症(内异症)以具有生长功能的子宫内膜出现在盆腔、卵巢等部位为特征，其发病机制不明，有研究表明L4一6」内异症患者也存在Thl/Th2细胞应答失衡。本研究通过检测慢性乙型肝炎合并内异症患者血清及腹腔积液中IFN-y,TLS水平了解该类患者的Th细胞亚群状态，以期为临床治疗提供指导作用。　　1资料与方法　　1.1一般资料收集本院2011年6月至2011年12月住院经腹腔镜手术治疗，并经病理证实的内异症患者60例，其中合并慢性乙型肝炎患者30例，年龄24一29(26.3士2.6)岁;单纯内异症患者30例，年龄23}34X27.9士4.5}岁以同期行输卵管结扎或吻合术的无合并慢性乙型肝炎、无内异症患者20例为对照组，年龄22一30(25.9士3.1)岁。各组年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有受试者肝功能正常，未使用影响免疫功能的药物。本研究经本院伦理委员会批准，告知受试者研究目的及意义，并签署知情同意书1.2方法1.2.1标本采集单纯内异症组、慢性乙型肝炎合并内异症组及对照组患者均于手术当日晨6;00空腹抽取静脉血3m1，离心后，取上清液置一700C冰箱待测。腹腔积液:所有患者均于腹腔镜术中，采用穿刺针抽取子宫直肠窝的腹腔积液4ml，离心后，置一70℃冰箱待测。　　1.2.2实验室检查用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELIS}})检测IFN一，(pg/ml)、IL-4(pg/ml水平;并计算IFN-IL-4比值。人IFN-y,IL-4的ELISA检测试剂盒为美国Genzvme公司产品，深圳晶美生物有限公司分装1.3统计学处理数据采用SPSS11.0统计软件分析，测定数据以无士、表示，采用t检验，p<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　单纯内异症组和慢性乙型肝炎合并内异症组血　　清、腹腔积液中IL}R水平均高于对照组(t=2.15,2.24,P<0.05;t=2.96,3.01,P<0.01)，单纯内异症组和慢性乙型肝炎合并内异症组血清、腹腔积液中IFN-y水平下降，与对照组比较，其差异均有统汁学意义(t=2.32,2.15，P<0.O5;，=3.12,2.75,P<0.01);单纯内异症组和慢性乙型肝炎合并内异症组血清、腹腔积液中IL-4/IFN-，水平明显升高，与对照组比较，其差异均有统计学意义(t=2.52,2.28，P<0.O5;t=3.23，2.85，P<0.O1)。　　慢性乙型肝炎合并内异症组血清、腹腔积液ILK,IL-4iIFV-y水平高于单纯内异症组(t=2.37,2.35,2.43,2.49,P<0.05)，而血清、腹腔积液中IFN-y水平低于单纯内异症组(t=2.49,:=2.19,P<0.05)，见表1。　　3讨论　　近年来发现Thl,Th2细胞对病毒的清除过程有着重要的调节作用.平衡失调是导致乙型肝炎病毒感染慢性化的重要因素，在HBV'感染患者中，Thl/Th2细胞失衡是肝脏疾病的主要发病机制。　　Thl细胞以其分泌的细胞因子IFN-，为代表，Th2细胞则以细胞因子IL-4为代表。Th1和Th2细胞在机体免疫反应及疾病发生过程中起截然不同的作用。Thl亚群主要针对细胞内的病原体，介导细胞免疫。Thl细胞占优势时有利于清除细胞内的病原体、但易引起宿主损伤。Th2亚群主要针对细胞外的病原体，介导体液免疫。Th2优势时通过限制破坏性Thl实现保护性免疫，常引起疾病的慢性化。　　在乙肝病毒感染过程中如果Thl细胞亚群占优势，将促进细胞免疫反应，增强CD8十T细胞的活性，从而有利于清除细胞内病毒，但同时加重了肝细胞的损伤。如果Th2细胞亚群占优势，将促进体液免疫反应，并抑制细胞免疫，自身毒性T淋巴细胞活性减弱，感染慢性化刘骏与盛吉芳〔2研究认为机体对HBV的免疫应答失衡是慢性乙型肝炎的重要发生机制之一，表现为Thl型免疫低下而Th2型免疫亢进。Thl型免疫低下致使免疫系统不能产生足量的Tc细胞及Thl型细胞因子以杀伤、破坏病毒感染的靶细胞和抑制病毒基因的复制及表达，机体不能及时清除病毒;Th2型细胞因子则进一步抑制Thl型免疫应答;病毒抗原的持续刺激又诱导特异性T细胞凋亡或无能，因此形成宿主对病毒抗原的免疫耐受;最终导致了HBV的慢性持续感染。Atano等}3曾报道慢性乙型肝炎患者与健康对照者比较Th2细胞水平更高。对干扰素治疗无应答者IL-4表达高水平，Thl细胞显著低水平。　　内异症是一个多因素的疾病，腹膜免疫应答发生改变参与了子宫内膜在子宫外的发展传播内异症的妇女细胞免疫应答减弱的原因不明，但有研究表明这类患者T细胞功能改变，而非免疫细胞数量的改变而导致内膜异位症患者细胞毒应答减弱拼Mier-Cabrera等「a,发现与无内异症患者比较，内异症患者腹腔T淋巴细胞产生的IL-2,IFN-y水平低，而IL-10水平高，但IL-4水平无显著差异呈现减弱的Thl应答。内异症患者腹腔积液淋巴细胞表现为局部免疫应答失衡，偏向Th2应答外周血T淋巴细胞也表现出同样模式。而IL-2/IFN-w对于促进和增强足够的细胞毒免疫应答是必要的，这些结果表明内异症患者体内免疫改变非免疫细胞数量而是功能性改变〔al。国内有文献报道表浅型、深部浸润型内异症患者腹腔液中IL-4水平高于对照组，而IFN-y水平低于对照组S。然而也有研究表明将内异症患者根据病情分为轻度(ASRMI一II)，进展期(SRMIII-W)，进展期患者与正常对照比较CD3'CD8一细胞产生的IFN-y显著增加，而轻度异位症患者与对照组比较差异无统计学意义(P>O.O5)。内异症患者腹腔积液淋巴细胞表现为局部免疫应答失衡，偏向Th2应答。内异症患者Thl/Th2应答偏移，细胞免疫功能下降，体液免疫增强，并且与病情轻重相关，导致免疫机制不能清除异位内膜，从而使异位内膜逃避免疫监视而种植、生长。　　由于慢性乙型肝炎、内异症这两种疾病都表现为Th2应答优势，本院通过检测慢性乙型肝炎合并内异症患者血清及腹腔积液中IFN-y,IL11水平了解该类患者的Th细胞亚群状态，以期为临床治疗提供指导作用。本研究发现单纯内异症患者、慢性乙型肝炎合并内异症患者与正常对照组比较均表现为高ILK、低IFN-y水平，呈现Th2细胞应答优势而慢性乙型肝炎合并内异症患者与单纯内异症患者相比更表现为Th2细胞应答增强。这两种疾病免疫状态之间是否存在一定关联?　　本研究中的慢性乙型肝炎患者均肝功能正常，处于对HBO`的免疫耐受期。我国的慢性乙型肝炎无症状携带者主要发生在婴幼儿期感染，这类人群表现为ThI/Th2应答偏移，以Th2细胞应答占优势。是否慢性乙型肝炎患者的Th2细胞应答优势导致异位内膜能更有效的逃避机体的免疫监视而生长，有待今后进一步研究其机制。笔者认为合并慢性乙型肝炎加强了内异症患者的Th2应答优势是否促进细胞免疫应答的治疗，能否有利于慢性乙型肝炎合并内异症患者的治疗有待进一步证实。　　参考文献　　赵楚生,陈瑞烈,林少锐. 乙型肝炎外周血Th1/Th2及Te1/Te2细胞失衡的临床意义研究[J].中国全科医学,2011,(05):1665-1668.doi:10.3969/j.issn.1007-9572.2011.15.013.　　刘骏,盛吉芳. 慢性乙型肝炎患者血清Th1/Th2型细胞因子水平研究[J].国际流行病学传染病学杂志,2006,(01):15-17.doi:10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2006.01.004.　　Atan(o),Aksu G,(O)zgen(c) F. Determination of intracellular Th1/Th2 type cytokines in lymphocytes of chronic hepatitis B patients treated with interferon-alpha[J].Turkish Journal of Gastroenterology,2010,(04):401-410.　　Mier-Cabrera J,Jiménez-Zamudio L,García-Latorre E. Quantitative and qualitative peritoneal immune profiles,T-cell apoptosis and oxidative stress-associated characteristics in women with minimal and mild endometriosis[J].British Journal of Obstetrics and Gynaecology,2011,(01):6-16.　　刘丹,张雪玉,刘瑞. 深部浸润型与表浅型内异症者腹腔液Th1、Th2细胞因子变化[J].生殖与避孕,2012,(05):311-314.　　Gmyrek GB,Sieradzka U,Goluda M. Flow cytometric evaluation of intracellular cytokine synthesis in peripheral mononuclear cells of women with endometriosis[J].Immunological Investigations,2008,(01):43-61.doi:10.1080/08820130701554962.