两种胶体用于治疗失血性休克犬对红细胞免疫功能影响的对比研究
发表时间：2009-07-20 浏览次数：1291次
王海英,曾洪波,靳琼瑶,孙小琳,朱昭琼 (遵义医学院附属医院麻醉科,贵州遵义563003)
摘 要:目的 应用6%羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)130/0. 4 (商品名:万汶)和国产聚明胶肽(商品名:菲克雪浓)治疗失血性休克犬,对比观察2种胶体的治疗效果和对红细胞免疫功能的影响。方法 将18只犬用随机数字表法分成3组,每组6只:生理盐水组(A组)、HES组(B组)、聚明胶肽组(C组)。采用W iggers改良法制作犬可逆性休克模型,使平均动脉血压降至(45. 56±3. 69)mmHg,并维持60 min。然后,各组分别回输不同成分的液体进行治疗。分别于休克前、休克60 min和休克治疗10、30、60 min测血流动力学指标(MAP、HR、CO)。同时,于休克前、休克60 min及休克治疗60 min取静脉血检测血浆中MDA的含量及红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率。结果 各组休克60 min时MAP与CO明显低于休克前(P<0·01),而HR明显高于休克前(P<0·01);血浆中MDA的含量明显升高(P<0·01),红细胞C3b受体花环率降低而红细胞免疫复合物花环率增高(P<0·01);各组休克治疗10、30、60 min时,各项指标均有不同程度地恢复,其中以HES组恢复最佳(P<0·01,P<0·05)。结论 HES能达到良好的休克治疗效果,并能减轻失血性休克引起的红细胞免疫功能的降低。
关键词:失血性休克;羟乙基淀粉;聚明胶肽;红细胞免疫
中图法分类号:R331. 141;R605. 971;R977. 8 文献标识码:A
Effect of two colloidal fluids on red blood cell immune function in dog model of hemorrhagic shockWANGHai-ying,ZENG Hong-bo,JIN Qiong-yao,SUN Xiao-lin,ZHU Zhao-qiong(Department fAnesthesiology,ZunyiMedicalCollege,ZunyiGuizhou 563003,China)
Abstract:Objective To observe the therapeutic efficacy of 6% hydroxyethyl starch 130/0. 4(tradename:voluven)and polygeline on dogwith hemorrhagic shock and their effecton immune function of red blood cells(RBC).Methods Eighteen dogswere randomized into three groups(n=6 in each group):normal so-dium group,voluven group and polygeline group. Hemorrhagic shockmodelswere setup according toW iggers’method. Themean arterial pressure valuewas bled to(45. 56±3. 69)mmHgwithin 10min andmaintained at this level for60 min. Subsequently the dogswere resuscit atedwith normal saline orvoluven orpolygeline. The hemodynamicsweremeasured before and 60min after shock and 10,30 and 60min after infusion. The concen-trations ofMDA in plasm,C3b receptor garland rate(RBC-C3bRR)and RBC immune complexes garland rate (RBC-ICR)weremeasured.Results At60min aftershock,MAP andCOwere significantly lower than these before shock(P<0·01),butHR was significantly higher than thatbefore shock(P<0·01). The concentra-tions ofMDA in plasm were increased significantly(P<0·01),and the levels ofRBC-C3bRR were depressed in all three groups,but the levels ofRBC-ICR in three groupswere increased significantly in all three groups(P<0·01). At10,30,60min after infusion,all indexes in the three groups recovered in various degree,es-pecially in the voluven group(P<0·01 orP<0·05).Conclusion Hydroxyethyl starch has satisfactory anti-hemorrhagic shock therapeutic efficacy and can relieve the depressed immune function of red blood cells caused by hemorrhagic shock.
Key words:hemorrhagic shock;hydroxyethyl starch;polygeline;red blood cell immunity
失血性休克是一种最常见的休克,是低血容量性休克的一种,容量治疗是其最重要的措施,但以何种溶液能够更有效地恢复血流动力学,改善机体的病理生理状况,提高生存率仍在研究中。6%羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)(商品名:万汶)和聚明胶肽(商品名:菲克雪浓)是临床上常用的治疗失血性休克的两种胶体液。目前,关于它们的扩容效果及对凝血功能、血液流变学影响的报道较多[1, 2],但对于它们是否影响红细胞免疫功能,国内外尚少见报道。本实验拟探讨应用HES和聚明胶肽治疗失血性休克犬,对比观察它们的治疗效果以及对红细胞免疫功能的影响,为临床治疗失血性休克提供参考。
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
MDA试剂盒由南京建成生物有限公司提供;酵母菌由上海长海医院血液免疫科提供; 7000型多功能心电监护仪购于德国SIEMENS公司。
1. 2 方法
1. 2. 1 实验分组 体质量15~20 kg的健康实验犬18只,雌雄兼用,由本校实验动物中心提供。按随机数字表法将这18只犬分成3组,每组6只。根据抗休克中输入液体成分的不同分为生理盐水组(A组):输入等量的生理盐水;HES组(B组):输入等量的HES;聚明胶肽组(C组):输入等量的聚明胶肽。
1. 2. 2 实验步骤 实验组动物经腹腔注射2. 5%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉,然后经静脉注射肝素(300 U/kg)致全身肝素化。行动静脉穿刺,右股动脉插管接换能器以进行有创血压测定;左股动脉插管连接储血袋用来放血;左股静脉插管以备输液。经右颈内静脉插入Swan-Ganz导管至肺动脉总干,备血流动力学指标的测定。采用W iggers改良法制作犬可逆性休克模型:左股动脉放血(速度为2. 0~2. 5 ml·kg-1·min-1)使平均动脉血压降低在(45. 56±3. 69)mmHg,并维持60 min。在此期间根据平均动脉压的波动情况给予放血或回输血液,以稳定血压。待休克60 min后回输液体进行抗休克治疗,回输时间与放血时间基本保持一致,抗休克治疗60 min后进行观察。
1. 2. 3 实验指标测定 ①血流动力学:用多功能心电监护仪,分别于休克前(T0)、休克60 min(T1)和抗休克治疗10 min(T2)、30 min(T3)及60 min(T4)测定血流动力学平均动脉压(MAP)、心率(HR)和心排出量(CO)的变化。②血浆丙二醛含量(MDA):分别于T0、T1、T4取静脉血5 ml注入抗凝管中混匀,3 000 r/min离心10 min后取血浆,用硫代巴比妥酸法测定血浆中MDA含量的变化。③红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR):分别于T0、T1、T4取静脉血5 ml注入抗凝管中混匀, 3 000 r/min离心10 min后,取红细胞与等体积红细胞保存液(Rowe液)混合后放入液氮保存。采用酵母菌玫瑰花环法检测RBC-C3bRR和RBC-ICR。
1. 3 统计学处理
实验数据以-x±s表示,用SPSS 11. 0统计学软件进行单因素方差分析,多组间两两比较行q检验。
2 结果
2. 1 血流动力学指标
2.1.1 MAP检测 各组在抗休克治疗后各时点的MAP较T1时均有明显回升(P<0·01)。A组抗休克治疗后MAP恢复较,T2、T3时A组MAP显著低于B组和C组(P<0·05)。T4时,B组显著高于A组(P<0·01),C组显著低于B组(P<0·05)。
2. 1. 2 HR检测 各组在抗休克治疗后各时点的HR较T1时均有明显地回降(P<0·01)。A组抗休克治疗后HR恢复较,T2、T3时,A组与B、C组比较有显著性差异(P<0·01,P<0·05)。T4时,B组均显著低于A组与C组(P<0·01)。
2. 1. 3 CO变化 各组在抗休克治疗后各时点的CO较T1时均有明显地回升(P<0·01)。A组抗休克治疗后CO恢复较差,T3时,A组与B、C组比较有显著性差异(P<0·01),T4时, B组均显著高于A组与C组(P<0·01,P<0·05)。另外, B组抗休克治疗后各时点的CO均高于T0时水平(P<0·01,P<0·05)(表1)。
2. 2 血浆中MDA含量
与T0相比,各实验组在T1时血浆中MDA含量均显著增加(P<0·01)。T4时,各组血浆中MDA含量较T1时均有不同程度的显著下降(P<0·01),但各组仍高于T0时水平(P<0·01),且B组显著低于A组与C组(P<0·01,P<0·05)。
表1 休克前、后及抗休克后各时相点血流动力学的变化(n=6,-x±s)指标 T0T1T2T3T4MAP(mmHg) A组135. 67±14. 01 46. 33±2. 50b105. 33±14. 65bd106. 50±12. 83bd98. 83±13. 24bd B组132. 33±15. 62 47. 33±2. 34b126. 17±13. 70de123. 33±12. 27de122. 67±13. 88df C组132. 00±12. 13 47. 17±3. 45b124. 83±16. 25de122. 17±11. 16de106. 00±11. 97bdgHR(次/min) A组172. 33±9. 73 223. 17±18. 33b195. 50±10. 10bd193. 17±13. 86ad192. 17±11. 67ad B组175. 50±14. 04 218. 83±17. 21b170. 50±13. 59df167. 00±15. 84df164. 00±13. 71df C组175. 00±13. 46 216. 33±18. 93b169. 83±14. 02df173. 17±15. 41de192. 83±11. 44achCO(L/min) A组1. 84±0. 41 <0. 5b1. 70±0. 39d1. 38±0. 34ad1. 16±0. 51bd B组1. 78±0. 66 <0. 5b2. 96±0. 90bde3. 00±0. 80bdf2. 68±0. 54adf C组1. 76±0. 73 <0. 5b2. 47±0. 83d2. 38±0. 46df1. 67±0. 77dgT0:休克前;T1:休克60 min;T2、T3、T4分别为抗休克治疗10、30、60 min a:P<0·05,b:P<0·01,与T0比较;c:P<0·05,d:P<0·01,与T1比较;e:P<0·05,f:P<0·01,与A组比较;g:P<0·05,h:P<0·01,与B组比较
2. 3 红细胞免疫功能
与T0相比,各实验组在T1时RBC-C3bRR均显著降低(P<0·01),而RBC-ICR均显著增高(P<0·01)。T4时,各组RBC-C3bRR较T1时均有不同程度的增高(P<0·01,P<0·05),但各组仍低于T0时水平(P<0·01),且B组显著高于A组与C组(P<0·01,P<0·05)。T4时,各组RBC-ICR较T1时均有显著地降低(P<0·01,P<0·05),但各组仍高于T0时水平(P<0·01,P<0·05),且B组显著低于A组与C组(P<0·01,P<0·05)(表2)。
表2 休克前、后及抗休克后各时相点MDA、红细胞免疫功能的变化(n=6,-x±s)指标 T0T1T4MDA(nmol/L) A组5. 02±1. 03 18. 68±1. 39b13. 80±0. 98bd B组5. 58±1. 52 18. 52±1. 58b10. 51±1. 03bdf C组5. 39±1. 23 18. 41±1. 07b12. 46±2. 06bdgRBC-C3bRR(% ) A组35. 50±3. 02 16. 50±2. 74b21. 50±4. 42bc B组36. 17±3. 49 16. 33±2. 94b30. 17±3. 76bdf C组35. 67±4. 63 17. 50±3. 08b25. 00±3. 90bdgRBC-ICR(% ) A组35. 83±3. 49 56. 33±4. 68b49. 67±4. 84bc B组35. 67±4. 03 55. 50±3. 39b41. 17±3. 06ade C组35. 67±3. 38 56. 17±4. 07b47. 00±4. 34bdgT0:休克前;T1:休克60 min;T4:抗休克治疗60 min a:P<0·05,b:P<0·01,与T0比较;c:P<0·05,d:P<0·01,与T1比较;e:P<0·05,f:P<0·01,与A组比较;g:P<0·05,与B组比较
3 讨论
提高失血性休克的治疗效果是患者安全的渡过围手术期必要条件之一。近年来,中分子羟乙基淀粉(HES)广泛应用于预防和治疗低血容量, HES(130/0. 4)[3]是新一代的中分子羟乙基淀粉,与HES(200/0. 5)相比其副作用更小。它具有扩容效果显著、维持时间长、过敏发生率较低、无抗原性、对肝肾功能影响小,另外还具有改善微循环和增加组织氧供的优点[4]。聚明胶肽是新一代的明胶类血浆代用品,是牛胶原蛋白降解后球状明胶多肽,相对分子质量为27·5×103~39. 5×103 [5]。本实验通过应用HES与聚明胶肽治疗休克犬的研究显示:在休克治疗10 min和30min时,MAP、HR、CO均能较好的恢复,两者无显著性差异,均优于生理盐水组,但在休克治疗60 min时,仅HES能维持较好的血流动力学指标,优于生理盐水组和聚明胶肽组,说明HES的扩容效能强,能有效改善休克机体的血流动力学,而且扩容维持时间较长,优于聚明胶肽。另外,HES在休克治疗后的各时间点的心排量均高于休克前,说明其增加心排量的能力较强。
红细胞膜上具有免疫黏附作用的C3b受体,通过该受体的免疫粘附作用使红细胞具有携带、清除免疫复合物、识别储存抗原、促进吞噬细胞吞噬等多种免疫功能。测定RBC-C3bRR和RBC-ICR,可分别了解红细胞C3b受体活性和红细胞黏附免疫复合物的能力。本研究结果显示:犬经过1 h的休克期后,其RBC-C3bRR降低、RBC-ICR升高,说明休克造成红细胞继发性免疫功能下降;经过抗休克治疗后1 h,各组RBC-C3bRR和RBC-ICR较休克时均有不同程度的恢复,但以HES组恢复较好,均显著优于其余两组。说明HES通过纠正休克使红细胞免疫功能得到改善。许多研究表明组织在失血性休克和抗休克的过程中可产生大量氧自由基[6],它能攻击生物膜磷脂中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,导致细胞代谢、功能障碍甚至死亡。红细胞膜富含多不饱和脂肪酸,极易受氧自由基的攻击而出现功能障碍[7]。大量研究表明氧自由基可损害红细胞的免疫功能。丙二醛(MDA)是过氧化物的降解产物,可间接反映细胞损伤的程度。本研究结果显示:犬休克60 min时,其DA显著增加,而此时RBC-C3bRR降低、RBC-ICR升高,似乎MDA和红细胞免疫功能存在着某种联系,也就是说氧自由基有可能是造成红细胞免疫功能下降的重要因素之一;经休克治疗60 min后,血浆中MDA含量较休克时均有不同程度的显著下降,但HES组均显著低于其余两组,说明HES通过其较强的抗休克能力而使血浆中MDA含量降低,进而使红细胞免疫功能得到改善。
综上所述,本实验结果提示:①失血性休克期可使氧自由基大量产生同时伴有红细胞免疫功能低下,氧自由基可能损害红细胞免疫功能。②HES通过其较强的抗休克能力而使血浆中MDA含量降低,进而使红细胞免疫功能得到改善,优于聚明胶肽。
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