2型糖尿病肾病患者免疫相关因素分析

　　作者：解晓琴,毛达勇,孙竞　　作者单位：郧阳医学院附属太和医院检验科，湖北 十堰

　　【摘要】 目的:探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血液中细胞免疫、体液免疫的变化。方法:采用流式细胞术和免疫比浊法测定42例糖尿病肾病患者血液细胞免疫参数CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、B细胞和NK细胞,及血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)等体液免疫参数，并与50例2型糖尿病无肾病者及46例健康体检者比较。结果:2型糖尿病无论是否并发肾病，与健康对照组比较CD3、CD4、CD4/CD8、B、NK显著性减低(P<0.01)，IgA、IgM、C3、C4显著升高(P<0.01);并发肾病组C4较单纯糖尿病组显著增高(P<0.01)。结论:2型糖尿病肾病患者存在细胞免疫和体液免疫异常，应提高患者免疫功能。

　　【关键词】 糖尿病,细胞免疫,体液免疫

　　Abstract: Objective To investigate the changes of cellular immunity and humoral immunity in patients with type 2 diabetic nephropathy.Methods The cellular immunity indexes T cell subsets(CD3,CD4,CD8),CD4/CD8,Bcells,nature killer cells(NK) and the humoral immunity indexes immunoglobulins(IgG,gA,IgM),complements(C3,C4) in 42 patients with type 2 diabetic nephropathy were determined with flow cytometry(FCM) and immune turbidimetry,then compared with 50 diabetic mellitus patients without nephropathy and 46 normal control. Results The levels of CD3,CD4,CD4/CD8,Bcells,NK in type 2 diabetic mellitus patients with and without nephropathy were significantly lower than those of control group(P<0.01),but the levels of IgA,IgM,C3,C4 were significantly higher than those of control group.The level of C4 in patients with type 2 diabetic nephropathy was significantly higher than that of type 2 diabetic mellitus patients(P<0.01).Conclusion The cellular immunity and humoral immunity were abnormal in patients with type 2 diabetic nephropathy and their immune function should be improved.

　　Key words: Diabetic mellitus;Cellular Immunity;Humoral Immunity

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是2型糖尿病最常见的并发症之一，其发病机制复杂，机体的免疫损伤在其形成过程中可能起一定的作用，本文通过对细胞免疫和体液免疫功能指标的测定，以了解2型糖尿病肾病患者机体免疫状况。

　　1 材料与方法

　　1.1 对象选取

　　随机选取我院2009年7月-2009年12月住院病人，符合WHO糖尿病诊断标准。其中单纯2型糖尿病组50例，男26例，女24例，年龄34～62岁(平均51.6岁)，糖尿病病程3～4年。肝、肾功能、血脂、血常规、心电图等检查均正常。2型糖尿病伴肾病患者42例，男性22例，女性20例，年龄39～66岁(平均53.1岁)，糖尿病病程约4年，以尿微量白蛋白≥30 mg/24 h为界。另选门诊健康体检者46例作正常对照。

　　1.2 检测方法和指标

　　采用美国Beckman Coulter公司流式细胞仪(Coulter Epics XL型)及所有包括异硫氰酸荧光素(FITC)标记的单克隆抗体试剂，按试剂说明书操作，计数CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、B细胞、NK细胞。BN100型自动特定蛋白分析仪(Dade-Behring公司)及配套试剂测定IgG、IgA、IgM、C3、C4含量。

　　1.3 统计学处理

　　用SPSS11.0软件包进行统计分析，P<0.05有统计学意义，数据以均数±标准差(x±s)表示。

　　2 结果

　　2型糖尿病无论是否并发肾病，与健康对照组比较CD3、CD4、B细胞、NK细胞显著减少(P<0.01)，CD4/CD8比值亦有不同，IgA、IgM、C3、C4浓度明显升高(P<0.01);肾病组与单纯糖尿病组比较C4显著增高(P<0.01)，其它指标两组间无明显差异。 各组间细胞免疫计数结果比较(x±s,%)注：与对照组比较，*P<0.01表2 各组间体液免疫参数的比较(x±s,g/L)注：与对照组比较，*P<0.01;与单纯糖尿病组比较，ΔP<0.01

　　3 讨论

　　2型糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的临床常见病，患者体液免疫和细胞免疫功能均低下，易患各种慢性并发症。Navarro JF等[1]认为2型糖尿病伴肾病患者机体免疫功能低下，可能在肾病发展过程中起一定的作用，但系统反应体液免疫和细胞免疫功能指标之间的比较研究尚不多见。

　　T细胞为异质性群体，外周血成熟T细胞可分为CD4+和CD8+T细胞两亚群，其中CD4+T细胞识别主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ递呈的抗原肽，经活化MΦ而诱生炎症，在宿主抗胞内病原感染中起主要作用。CD8+T细胞识别MHCⅠ递呈的抗原肽，根据其功能可分为细胞毒性T细胞(CTL)和抑制性T细胞(Ts)，CTL是免疫应答的主要效应细胞，可特异性杀伤靶细胞，在肿瘤免疫和抗病毒感染免疫中发挥重要作用。B细胞在受到抗原刺激时发生增殖、分化，进入激活状态，并迅速向浆细胞分化，产生各种抗体参与体液免疫应答。NK细胞具有细胞毒性效应，无需抗原预先致敏就能自发杀伤靶细胞，在肿瘤免疫和抗病毒感染中均起重要作用。CD4/CD8比值是临床上常用作了解机体细胞免疫功能的敏感指标。

　　本研究结果显示，2型糖尿病患者无论是否并发肾病,其CD3、CD4、CD4/CD8、B、NK显著性减少，与张宏[2]，吴晓燕[3]等的研究结论一致。表明糖尿病患者体内细胞免疫功能已遭损坏，用单克隆抗体检查肾小球时，可发现微量或一过性T淋巴细胞，可能是由于这些细胞在体内的重新分布，导致血液各种免疫活性细胞的减少。有研究发现，2型糖尿病患者NK细胞活性降低，使T细胞免疫功能、细胞因子分泌及受体水平异常，造成2型糖尿病患者免疫功能障碍[4]，但其在糖尿病肾病发展进程中的作用尚需进一步研究。

　　免疫球蛋白和补体可代表机体体液免疫状态，是体内非特异性免疫的重要指标。本研究结果表明2型糖尿病无论是否并发肾病，患者体内IgA、IgM、C3、C4显著升高，IgG无变化，进一步证实机体中存在非活动性炎症反应。IgA升高与Eguchi K等[5]报道相同，IgA主要在黏膜抵抗细菌、病毒感染和食物抗原中起重要防御作用，IgA升高是由于上述原因使大量淋巴细胞长期处于有丝分裂期所致。IgM和补体升高与Akinlade KS等[6]报道相同，可能是机体非特异性免疫应答的结果。在肾小球系膜细胞、内皮细胞和上皮细胞上具有多种免疫球蛋白受体，能分泌多种炎症介质，使其本身成为炎性细胞，在肾小球内免疫复合物的持续存在或沉积，或机体针对肾小球内免疫球蛋白产生自身抗体，则可导致病变的持续和进展。因此，这些增高的免疫球蛋白在糖尿病肾病的发展进程中可能起负作用。

　　上述结果提示2型糖尿病及其肾病患者机体存在明显免疫功能紊乱和炎症介质增加，因此在预防和治疗过程中，应时刻关注机体免疫状态，有针对性进行必要的增强免疫力锻炼，减少感染。但糖尿病药物是否加重并发肾病患者肾脏负担尚不得而知。

　　【参考文献】

　　[1]Navarro JF,Mora C.Diabetes,inflammation,proinflammatory cytokines,and diabetic nephropathy[J].Scientific World Journal,2006,9(6):908-917.

　　[2]张 宏,于德民,陈 樱,等.2型糖尿病患者免疫功能变化与血糖和胰岛素水平相关性的研究[J].免疫检验和临床医学杂志,2002,9(2):90-94.

　　[3]吴晓燕,汤旭磊,高 林,等.外周血Th1/Th2淋巴细胞失衡与2型糖尿病肾病的关系[J].兰州大学学报(医学版),2007,33(1):30-33.

　　[4]尹 萍,金文敏.2型糖尿病患者NK细胞活性降低及其临床意义[J].广东医学,2008,29(1):105-106

　　[5]Eguchi K,Yagame M,Suzuki D,et al.Significance of high levels of serum IgA and IgAclass circulating immune complexes (IgACIC) in patients with noninsulindependent diabetes mellitus[J].J Diabetes Complications,1995,9(1):42-44.

　　[6]Akinlade KS,Arinola OG,Salimonu LS,et al.Circulating immune complexes,immunoglobulin classes (IgG,IgA and IgM) and complement components (C3c,C4 and Factor B) in diabetic nigerians[J].West Afr J Med,2004,23(3):253-255