老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原测定的意义

　　作者：陈秀益 作者单位：210024江苏省南京市，江苏省老年医学研究所糖尿病防治研究中心

　　【摘要】 目的 探讨老年人群及老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原测定的变化意义。 方法 随机选取96例老年2型糖尿病患者、90例非老年2型糖尿病患者(尿微量白蛋白阴性)和93例老年非糖尿病人，采用ELISA法测定尿Ⅳ型胶原，分析其在老年糖尿病患者中的意义。 结果 (1)老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原[(13.37±6.42) ng/ml]明显高于老年非糖尿病患者[(10.52±6.44) ng/ml](P<0.05)。(2)老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原与非老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原[(10.41±7.53) ng/ml]有显著差异(P<0.05)，2组间糖尿病病程无明显差异。 结论 (1)老年糖尿病患者相对于非老年糖尿病，以及老年非糖尿病患者尿Ⅳ型胶原显著性增高。(2)老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原的升高早于尿微量白蛋白，检测尿Ⅳ型胶原有助于早期发现老年糖尿病患者肾损害。

　　【关键词】 糖尿病 Ⅳ型胶原 肾小管功能 老年人

　　Significance of detection of urinary type Ⅳ collagen in elderly patients with type 2 diabetes mellitus CHEN Xiuyi，SHEN Zhixiang，CHEN Peipei，CHEN Yan，XIE Yuchun，BIAN Rongwen.Department of Endocrinology，Jiangsu Provincial Research Institute of Geriatrics，Nanjing 210024,China

　　【Abstract】　Objective To investigate the significance of urinary type Ⅳ collagen in elderly patients with type 2 diabetes. Methods Ninetysix elderly patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM)，90 middleaged patients with T2DM，and 93 elderly people without T2DM were randomly enrolled. Urinary type Ⅳ collagen was measured by the enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)，and the results were compared among the groups. Results (1) Urinary type Ⅳ collagen was much higher in elderly patients with T2DM than that in elderly people without diabetes (P<0.05). (2) Urinary type Ⅳ collagen increased significantly in elderly patients with T2DM than that in middleaged patients with T2DM(P<0.05). Conclusions (1) Urinary type Ⅳ collagen was much higher in elderly patients with T2DM . (2) Urinary type Ⅳ collagen is useful in diagnosis of renal lesions in elderly patients with type 2 diabetes because it appears before microalbuminuria.

　　【Key　words】 diabetes; type Ⅳ collagen; urine; renal tubule function; aged

　　随着医疗技术和人民生活水平的提高，全球几乎所有国家的人口结构都趋于老化，而我国人口的老年化趋势更加明显。全国1%人口抽样调查最新统计结果显示，截至2005年底，我国≥65岁老年人口占全国总人口的7.7%，而北京、上海等大城市老年人口比例已达到15%。同时我国的糖尿病发病率迅速增高，1990年发病率仅是3%，2005年大中城市的糖尿病发病率已经超过10%。高龄和糖尿病两大因素均对人的肾脏功能有严重损害，而肾脏是维持机体内环境稳定的重要器官，因此，研究老年肾脏以及老年糖尿病患者肾脏的特点有重要意义。本文旨在对老年2型糖尿病患者、非老年2型糖尿病患者和老年非糖尿病人尿Ⅳ型胶原水平进行比较，以探讨其临床意义。

　　1 对象与方法

　　1.1 研究对象 本研究糖尿病患者均来自2005年3月至2006年7月我院内分泌科门诊就诊的人群。入选标准：所有患者半年内均未作过造影剂检查，未使用肾毒性药物，继往无慢性肾小球肾炎病史及明确诊断的肾小管性疾病史，2型糖尿病患者均符合ADA 1997年诊断标准，并且血糖控制良好，检测尿微量白蛋白排除糖尿病肾病。老年非糖尿病组来自健康体检人群。本研究共分3组，A组为老年2型糖尿病患者，96例，年龄65～78岁，平均(70.68±5.42)岁;B组为非老年2型糖尿病患者，90例，年龄48～56岁，平均(53.71±3.13)岁，C组为老年非糖尿病人，93例，年龄65～79岁，平均(74.50±4.11)岁。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 标本收集 所有患者均早晨空腹取静脉血测定尿素氮、血肌酐(SCr)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)。同时收集晨尿以及24 h尿标本(加二甲苯防腐，混匀)，准确记录尿量，留取5 ml尿标本放入-30 ℃冰箱保存，待测定尿Ⅳ型胶原、尿微量白蛋白。

　　1.2.2 尿Ⅳ型胶原 用ELISA法紫外发光测定，测定范围0.8～50 ng/ml。试剂盒购自上海森雄公司，按试剂盒说明书操作。尿Ⅳ型胶原浓度以尿肌酐(Cr)校正，单位以ng/(mg·cr)表示。

　　1.3 统计学方法 数值以±s表示，应用SPSS 11.0统计软件进行处理。组间比较采用F、t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 基本资料 3组间血压2组老年组高于非老年组，但无显著性差异(P>0.05)。糖尿病组低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平较老年非糖尿病组高，但经比较无显著差异(P>0.05)，糖尿病组之间血糖无显著差异(P>0.05)，收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、SCr在各组间无显著性差异(P>0.05)，见表1。表1 3组基础资料比较

　　2.2 3组尿Ⅳ型胶原及尿微量白蛋白水平比较 老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原高于非老年糖尿病组及老年非糖尿病组，存在显著性差异(P<0.05)。而老年非糖尿病组与非老年糖尿病组之间无显著性差异。而比较3组之间尿白蛋白，无显著性差异，见表2。

　　2.3 糖尿病病程对尿Ⅳ型胶原的影响 糖尿病病程<10年组与10～15年组和>15年组均有显著差异(P<0.05)，10～15年组和>15年组之间有升高趋势但是没有显著性差异，见表3。表2 3组尿Ⅳ型胶原及尿微量白蛋白的比较 注：与A组比较，*P<0.05，**P<0.01表3 不同糖尿病病程对尿Ⅳ型胶原的影响注：与病程<10年组比较，*P<0.05

　　3 讨论

　　随着我国人口老年化趋势，老年人口增加迅速。随着年龄的增加，肾功能受损的发病率明显增加。据2006年统计北京地区老年人群肾小球滤过率受损有8.7%[1]，而1999年同样在该地区仅有2.17%[2]。SCr在检测中受影响因素较多而且不易早期发现肾损害，而早期发现肾脏损害对于肾脏病的防治至关重要。

　　糖尿病在老年人中发病率高，其肾损害以往主要通过尿微量白蛋白检测作为糖尿病肾病的诊断标准，但是有研究显示，在其出现异常之前已存在肾脏病理性损害[3]。探讨更敏感的指标更有利于糖尿病肾病早期预测。

　　Ⅳ型胶原由2种不同的结构肽链组成，分别是α1和α2，每条α链富含赖氨酸和羟脯氨酸，2条α1链和1条α2链组成杆状的三股螺旋结构为其单体分子，分子量549.8～599.8 kU，编码α链的基因区域有6个，分别是α1～α6。Ⅳ型胶原含量约占基底膜干重的50%，且随年龄增长所占比例增加。Ⅳ型胶原是肾小球以及肾小管上皮细胞基底膜重要成分，它的变化能反映这些细胞的动态代谢变化[4]。糖尿病肾病的基本病理改变包括肾小球和肾小管上皮组织肥大、基底膜增厚和细胞外基质堆积。而Ⅳ型胶原蛋白在病情进展过程中合成增加和(或)降解减少，使之在肾组织内积聚，最终导致肾硬化[5]。尿中Ⅳ型胶原水平不仅与肾组织内表达程度相一致，而且与肾小球基质基膜面密度(反映肾小球硬化的半定量指标)、肾间质纤维化及间质细胞数呈正相关，并随着肾硬化程度加重，尿中浓度逐渐增加，表明尿Ⅳ型胶原水平同步反映了肾组织中该物质的水平，并在一定程度上反映了肾损伤的严重性[6]。

　　但是，Ⅳ型胶原相对分子质量较大，正常状况下不能从肾小球滤过，那么聚集在肾组织中的Ⅳ型胶原是如何从尿液中排出的?有人检测了IgA肾病患者尿Ⅳ型胶原分子大小，发现其相对分子质量为340 kDa，故推测可能由于病变肾小球的结构破坏、肾小囊断裂，使积聚在病变小球及间质上的Ⅳ型胶原分子直接进入尿囊腔随尿排出;但这类患者往往合并有明显的蛋白尿和血尿[7]。

　　但本研究中作为没有微量白蛋白尿的老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原分子大部分不应是肾小囊断裂漏出[8]，而它同时作为肾小管上皮基底膜固有成分，那么我们推测从胶原分布看本研究所监测的尿Ⅳ型胶原的增加应该是肾小管上皮基底膜脱落产生为主。

　　本研究中我们发现老年糖尿病患者相对非老年糖尿病患者以及老年非糖尿病患者尿Ⅳ型胶原显著性增高。可见年龄因素影响尿Ⅳ型胶原浓度，并且独立于血压、血糖、血脂的影响(2组间无差异)。糖尿病病程同样可以影响尿Ⅳ型胶原，随着病程延长，尿Ⅳ型胶原浓度增高，并且这一因素独立于年龄因素之外。推测糖尿病本身存在其他因素随着病程、年龄的增加损伤肾脏，如糖基化终产物、过氧化反应、肾素血管紧张素醛固酮系统激活。本研究中尿Ⅳ型胶原出现差异时尿微量白蛋白之间无显著差异，故在老年2型糖尿病患者中尿Ⅳ型胶原异常比尿微量白蛋白出现的早，可以作为更早期预测肾损害的指标。

　　【参考文献】

　　Significance of detection of urinary type Ⅳ collagen in elderly patients with type 2 diabetes mellitus CHEN Xiuyi，SHEN Zhixiang，CHEN Peipei，CHEN Yan，XIE Yuchun，BIAN Rongwen.Department of Endocrinology，Jiangsu Provincial Research Institute of Geriatrics，Nanjing 210024,China

　　【Abstract】　Objective To investigate the significance of urinary type Ⅳ collagen in elderly patients with type 2 diabetes. Methods Ninetysix elderly patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM)，90 middleaged patients with T2DM，and 93 elderly people without T2DM were randomly enrolled. Urinary type Ⅳ collagen was measured by the enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)，and the results were compared among the groups. Results (1) Urinary type Ⅳ collagen was much higher in elderly patients with T2DM than that in elderly people without diabetes (P<0.05). (2) Urinary type Ⅳ collagen increased significantly in elderly patients with T2DM than that in middleaged patients with T2DM(P<0.05). Conclusions (1) Urinary type Ⅳ collagen was much higher in elderly patients with T2DM . (2) Urinary type Ⅳ collagen is useful in diagnosis of renal lesions in elderly patients with type 2 diabetes because it appears before microalbuminuria.

　　【Key　words】 diabetes; type Ⅳ collagen; urine; renal tubule function; aged

　　随着医疗技术和人民生活水平的提高，全球几乎所有国家的人口结构都趋于老化，而我国人口的老年化趋势更加明显。全国1%人口抽样调查最新统计结果显示，截至2005年底，我国≥65岁老年人口占全国总人口的7.7%，而北京、上海等大城市老年人口比例已达到15%。同时我国的糖尿病发病率迅速增高，1990年发病率仅是3%，2005年大中城市的糖尿病发病率已经超过10%。高龄和糖尿病两大因素均对人的肾脏功能有严重损害，而肾脏是维持机体内环境稳定的重要器官，因此，研究老年肾脏以及老年糖尿病患者肾脏的特点有重要意义。本文旨在对老年2型糖尿病患者、非老年2型糖尿病患者和老年非糖尿病人尿Ⅳ型胶原水平进行比较，以探讨其临床意义。

　　1 对象与方法

　　1.1 研究对象 本研究糖尿病患者均来自2005年3月至2006年7月我院内分泌科门诊就诊的人群。入选标准：所有患者半年内均未作过造影剂检查，未使用肾毒性药物，继往无慢性肾小球肾炎病史及明确诊断的肾小管性疾病史，2型糖尿病患者均符合ADA 1997年诊断标准，并且血糖控制良好，检测尿微量白蛋白排除糖尿病肾病。老年非糖尿病组来自健康体检人群。本研究共分3组，A组为老年2型糖尿病患者，96例，年龄65～78岁，平均(70.68±5.42)岁;B组为非老年2型糖尿病患者，90例，年龄48～56岁，平均(53.71±3.13)岁，C组为老年非糖尿病人，93例，年龄65～79岁，平均(74.50±4.11)岁。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 标本收集 所有患者均早晨空腹取静脉血测定尿素氮、血肌酐(SCr)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)。同时收集晨尿以及24 h尿标本(加二甲苯防腐，混匀)，准确记录尿量，留取5 ml尿标本放入-30 ℃冰箱保存，待测定尿Ⅳ型胶原、尿微量白蛋白。

　　1.2.2 尿Ⅳ型胶原 用ELISA法紫外发光测定，测定范围0.8～50 ng/ml。试剂盒购自上海森雄公司，按试剂盒说明书操作。尿Ⅳ型胶原浓度以尿肌酐(Cr)校正，单位以ng/(mg·cr)表示。

　　1.3 统计学方法 数值以±s表示，应用SPSS 11.0统计软件进行处理。组间比较采用F、t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 基本资料 3组间血压2组老年组高于非老年组，但无显著性差异(P>0.05)。糖尿病组低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平较老年非糖尿病组高，但经比较无显著差异(P>0.05)，糖尿病组之间血糖无显著差异(P>0.05)，收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、SCr在各组间无显著性差异(P>0.05)，见表1。表1 3组基础资料比较

　　2.2 3组尿Ⅳ型胶原及尿微量白蛋白水平比较 老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原高于非老年糖尿病组及老年非糖尿病组，存在显著性差异(P<0.05)。而老年非糖尿病组与非老年糖尿病组之间无显著性差异。而比较3组之间尿白蛋白，无显著性差异，见表2。

　　2.3 糖尿病病程对尿Ⅳ型胶原的影响 糖尿病病程<10年组与10～15年组和>15年组均有显著差异(P<0.05)，10～15年组和>15年组之间有升高趋势但是没有显著性差异，见表3。表2 3组尿Ⅳ型胶原及尿微量白蛋白的比较 注：与A组比较，*P<0.05，**P<0.01表3 不同糖尿病病程对尿Ⅳ型胶原的影响注：与病程<10年组比较，*P<0.05

　　3 讨论

　　随着我国人口老年化趋势，老年人口增加迅速。随着年龄的增加，肾功能受损的发病率明显增加。据2006年统计北京地区老年人群肾小球滤过率受损有8.7%[1]，而1999年同样在该地区仅有2.17%[2]。SCr在检测中受影响因素较多而且不易早期发现肾损害，而早期发现肾脏损害对于肾脏病的防治至关重要。

　　糖尿病在老年人中发病率高，其肾损害以往主要通过尿微量白蛋白检测作为糖尿病肾病的诊断标准，但是有研究显示，在其出现异常之前已存在肾脏病理性损害[3]。探讨更敏感的指标更有利于糖尿病肾病早期预测。

　　Ⅳ型胶原由2种不同的结构肽链组成，分别是α1和α2，每条α链富含赖氨酸和羟脯氨酸，2条α1链和1条α2链组成杆状的三股螺旋结构为其单体分子，分子量549.8～599.8 kU，编码α链的基因区域有6个，分别是α1～α6。Ⅳ型胶原含量约占基底膜干重的50%，且随年龄增长所占比例增加。Ⅳ型胶原是肾小球以及肾小管上皮细胞基底膜重要成分，它的变化能反映这些细胞的动态代谢变化[4]。糖尿病肾病的基本病理改变包括肾小球和肾小管上皮组织肥大、基底膜增厚和细胞外基质堆积。而Ⅳ型胶原蛋白在病情进展过程中合成增加和(或)降解减少，使之在肾组织内积聚，最终导致肾硬化[5]。尿中Ⅳ型胶原水平不仅与肾组织内表达程度相一致，而且与肾小球基质基膜面密度(反映肾小球硬化的半定量指标)、肾间质纤维化及间质细胞数呈正相关，并随着肾硬化程度加重，尿中浓度逐渐增加，表明尿Ⅳ型胶原水平同步反映了肾组织中该物质的水平，并在一定程度上反映了肾损伤的严重性[6]。

　　但是，Ⅳ型胶原相对分子质量较大，正常状况下不能从肾小球滤过，那么聚集在肾组织中的Ⅳ型胶原是如何从尿液中排出的?有人检测了IgA肾病患者尿Ⅳ型胶原分子大小，发现其相对分子质量为340 kDa，故推测可能由于病变肾小球的结构破坏、肾小囊断裂，使积聚在病变小球及间质上的Ⅳ型胶原分子直接进入尿囊腔随尿排出;但这类患者往往合并有明显的蛋白尿和血尿[7]。

　　但本研究中作为没有微量白蛋白尿的老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原分子大部分不应是肾小囊断裂漏出[8]，而它同时作为肾小管上皮基底膜固有成分，那么我们推测从胶原分布看本研究所监测的尿Ⅳ型胶原的增加应该是肾小管上皮基底膜脱落产生为主。

　　本研究中我们发现老年糖尿病患者相对非老年糖尿病患者以及老年非糖尿病患者尿Ⅳ型胶原显著性增高。可见年龄因素影响尿Ⅳ型胶原浓度，并且独立于血压、血糖、血脂的影响(2组间无差异)。糖尿病病程同样可以影响尿Ⅳ型胶原，随着病程延长，尿Ⅳ型胶原浓度增高，并且这一因素独立于年龄因素之外。推测糖尿病本身存在其他因素随着病程、年龄的增加损伤肾脏，如糖基化终产物、过氧化反应、肾素血管紧张素醛固酮系统激活。本研究中尿Ⅳ型胶原出现差异时尿微量白蛋白之间无显著差异，故在老年2型糖尿病患者中尿Ⅳ型胶原异常比尿微量白蛋白出现的早，可以作为更早期预测肾损害的指标。