乳腺正常、癌周和癌组织中ER mRNA表达一致性及其临床意义的探讨
发表时间：2010-01-21 浏览次数：586次
乳腺正常、癌周和癌组织中ER mRNA表达一致性及其临床意义的探讨作者：韦伟 叶静 刘巧刿 韩彬 于志强 作者单位：1.北京大学深圳医院乳腺外科， 广东 深圳 ; 2.实验中心 【摘要】 目的 探讨同一患者乳腺正常、癌周和癌组织中，ER mRNA表达的一致性，以及对内分泌治疗效果的意义。 方法 ⑴87例乳腺癌患者，分别于患侧乳房的正常、癌周和癌组织取材；⑵使用RNA原位核酸杂交技术检测各种组织的ER mRNA阳性表达率。 结果 ⑴同一患者患侧的乳腺正常、癌周和癌组织，三者阳性表达率分别为41.4%（36/87），59.8%（52/87）和56.3%（49/87）。三者同为阳性表达者为31.0%（27/87），其与上述三数值相比，差异均有显著性（P<0.05）；⑵癌周和癌组织同为阳性表达者为52.9%（46/87）；⑶正常和癌组织同为阳性表达、正常和癌周组织同为阳性表达分别为34.5%（30/87）为和37.9%（33/87），与⑵项值相比，差异有显著性（P<0.05）。 结论 ⑴乳腺正常、癌周和癌组织阳性表达的不一致性，可能是影响内分泌治疗效果的因素之一；⑵增加除癌组织以外的癌周组织，甚至乳腺正常组织的ER状态了解，可能会有助于内分泌治疗的正确实施及更客观判断预后。 【关键词】 乳腺癌；ER mRNA 阳性率；ER mRNA 阳性表达；内分泌治疗 Investigation on clinical significance of ER mRNA concordance expression in normal breast tissue, tissue near the breast carcinoma and carcinoma tissue WEI Wei, YE Jing, LIU Qiao-Gui, et al. Surgery on Galactophore Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen, Guangdong 518036 [Abstract］ Objective To investigate the effect of hormone therapy by detecting the ER mRNA concordance expression in the same patient’s normal breast tissue, tissue near the breast carcinoma and carcinoma tissue. Methods ⑴ In 87 cases of breast cancer patients, sampling normal breast tissue, tissue near the breast carcinoma and carcinoma tissue from the same patient’diseased breast；⑵Using RNA nucleic acid hybridization in situ to detect ER mRNA positive rate in their specimen. Results ⑴The positive rate was 41.4%（36/87），59.8%（52/87）and 56.3%（49/87）in the diseased breast of same patient’s normal breast tissue, tissue near the breast carcinoma and carcinoma tissue. ⑵ 52.9% cases’carcinoma tissue and tissue near the breast carcinoma were ER mRNA positive expression at the same time. ⑶31.0%（27/87）of total cases whose three kinds of tissue were all positive expression, compared to former three figures respectively, the difference among them were all obvious（P<0.05）. Conclusion ⑴The imcompatibility of ER mRNA positive expression in normal breast tissue, tissue near the breast carcinoma and carcinoma tissue is probably one of the factors which influence the effect of hormone therapy. ⑵except carcinoma tissue, getting more message about ER condition in tissue near the breast carcinoma even normal breast tissue may help to put hormone therapy to practice more exactly and judge the prognosis more objectively. [Key words］breast cancer；ER mRNA positive rate；ER mRNA positive expression；hormone therapy 根据癌组织雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达情况所选择的内分泌治疗，是乳腺癌综合治疗中重要或不可缺少的组成部分。ER阳性病例内分泌治疗的有效率为50%～60%，ER和PR均为阳性者，有效率高达77%～80%；若ER及PR都为阴性，也有10%的有效率[1～2]。为何ER、PR均为阳性，内分泌治疗有效率并非100%，本文将探讨同一患者乳腺正常组织、癌周组织和癌组织中，ER mRNA表达的一致性，是否为影响内分泌治疗效果的因素之一。1 材料与方法 1.1临床资料 2006年3月至2008年3月，选择北京大学深圳医院乳腺外科已确诊的87例乳腺癌患者。均为女性，年龄（41.3±14.5）岁；32例行保留乳房的乳腺癌根治手术，其余行乳腺癌改良根治术；临床分期：Ⅰ期29例，Ⅱ期41例，Ⅲa期17例；均未行新辅助化疗。 1.2组织取材 同一患者的患侧乳房，癌组织取材于非坏死处的肿瘤组织，癌周组织取材于可触及肿瘤组织边缘外1cm～1.5cm的组织，正常组织取材于可触及肿瘤组织边缘外3cm～3.5cm的组织。 1.3ER mRNA的检测[3] 采用RNA原位核酸杂交（RNA nucleic acid hybridization in situ，RISH）检测所取材组织的ER mRNA阳性表达情况。 将新鲜取材组织切制成1.0 cm×0.8cm×0.2cm的组织块，4％多聚甲醛固定并储存于液氮内。之后制成厚度5μm的石蜡切片。ER寡核苷酸探针按Walter人的ER cDNA序列（5’一CTC CAG CTC GTT CCC TTG GAT一3’）合成，德国Boehringer Mannheim公司3'-Digoxigenin—VN标记试剂盒标记。 每张切片滴加40μl预杂交液，置37℃湿盒内孵育2h。甩干杂交溶液，每张切片滴加30μl探针杂交液(内含20ng地高辛标记的ER mRNA探针)，44℃湿盒内孵育3h。振荡漂洗切片后，做杂交后的显色处理。 1.4 阳性结果的判断与计数[4] RISH阳性信号位于癌细胞的胞质内，经NBT/BCIP显色为蓝色，呈细颗粒状。信号强，则颜色深，可呈蓝紫色或/和紫黑色。阳性等级按以下方法计数：阳性细胞11～30%为（+），31～70%为（++），>70%为（+++）。 1.5 统计学分析应用SPSS13.0 数据分析软件进行X2检验，P<0.05为有显著性差异。2 结 果 2.1 同一患者患侧的乳腺正常组织、癌周组织和癌组织，三者的阳性表达率分别为41.4%（36/87），59.8%（52/87）和56.3%（49/87）。 2.2 同一患者患侧的乳腺正常组织、癌周组织和癌组织，三者同为阳性表达者共计27例，占本组病例的31.0%（27/87）；三者同为阴性者共计22例，占本组病例的23.3%（22/87）。两者相比无显著性差异（P>0.05）。 不过，当三组织同为阳性表达时，表达程度均为（++）或（+++），性质与程度呈现良好的一致性。且三组织同为阳性表达率（31.0%）与2.1项的三数值相比，差异均有显著性（P<0.05）。 2.3 同一患者患侧的乳腺癌周和癌组织同为阳性表达者共计46例，占本组病例的52.9%（46/87）；两者的性质与程度也呈现良好的一致性，均为（++）或（+++）。并且该值与三组织同为阳性的表达率（31.0%）相比，差异有显著性（P<0.05）。 2.4 同一患者患侧的乳腺正常组织和癌组织同为阳性表达者，以及正常组织和癌周组织同为阳性表达者，分别为34.5%（30/87）和37.9%（33/87），两者相比无显著性差异（P>0.05）。3 讨 论 3.1选择RISH技术的基础 本研究采用的RNA原位核酸杂交（RISH），是指应用cRNA或寡核苷酸等探针，按碱基配对原则，检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其优于免疫组化检测乳腺各组织ER、PR表达的方法。因为如果在乳腺癌细胞内既检出ER、PR基因表达，又在同一切片同一部位内检出其蛋白表达，就表明是该部位的乳腺癌细胞ER、PR基因产生的蛋白。相反，如果仅有ER、PR蛋白表达而没有基因表达，表明该蛋白不是ER、PR基因所产生[4]。因此，本研究采用了相对准确、可靠的RISH技术，来检测各乳腺组织ER mRNA的表达。 3.2乳腺正常组织ER mRNA表达的临床意义 作为激素的靶器官，乳腺生长、发育和功能依赖于激素的支持，尤其是雌激素，其与乳腺的发育密切相关。在非肿瘤性疾病的青春期乳房肥大症，雌激素受体的阳性表达率可达88.89%，而在原发性小乳症，雌激素受体阳性表达仅为16.67%[5]。 本研究对乳腺正常组织进行的ER mRNA表达检测结果表明，约41.4%（36/87）的病例呈阳性表达，界于青春期乳房肥大症的88.89%，和原发性小乳症的16.67%之间，应为乳腺正常组织的表达状态。因其低于同一患者患侧的癌周组织和癌组织的ER mRNA表达阳性率，表明切除了肿瘤和癌周组织的乳腺癌术后之内分泌治疗，全身的治疗意义大于乳腺局部的治疗意义，且开始内分泌治疗的时间，应于化疗结束之后立刻进行。 3.3乳腺正常、癌周和癌组织ER mRNA表达一致性的临床意义 大量资料表明，ER阳性的乳腺癌辅助内分泌治疗能延长患者的无瘤生存期和总生存期[6]。然而，一些ER表达阳性的乳腺癌患者的内分泌治疗效果却未达到预期效果。 从本组资料看，同一患者患侧乳腺癌周和癌组织的阳性病例分别为59.8%（52/87）和56.3%（49/87），两组织同为阳性表达者约52.9%（46/87），上述三数值间相比无显著性差异（P>0.05）。但在癌周和癌组织均为阳性时，两者的性质与程度都呈现较明显的一致性，均为（++）或（+++）。说明保留乳房根治手术一定要彻底切除癌肿周围至少2cm组织的必要性，并部分诠释了内分泌治疗对一些乳腺癌局部复发患者有效的原因所在。 本组病例显示，同一患者患侧的乳腺正常组织、癌周组织和癌组织，三者的阳性表达率分别为41.4%（36/87），59.8%（52/87）和56.3%（49/87），而三者同为阳性表达者为31.0%（27/87），其与上述三值相比，差异有显著性（P<0.05）。目前检测乳腺癌组织ER、PR情况，免疫组化为常规方法，且只检测乳腺癌组织标本，并未对患乳组织进行全方位检测。因此，乳腺正常组织、癌周组织和癌组织之间存在的不一致性，可能对乳腺癌术后的内分泌治疗效果有一定影响，因此，增加除癌组织以外癌周组织，甚至乳腺正常组织的ER、PR状态了解，可能会有助于内分泌治疗的正确实施，以及更客观的判断预后。【参考文献】1. 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